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浙江大学学报. 农业与生命科学版Lily (Lilium spp.) is one of the most representative bulbous flowers. However, the vast majority of lilies have a long juvenile stage, which is a significant bottleneck for the development of the entire production industry. In this study, we analyzed the
郭振峰(GUO Zhenfeng) +7 more
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野生动物学报, 2015 根据Gen Bank中发表的犬瘟热病毒(CDV)的基因组序列设计了H和F基因的2对引物,通过RT-PCR扩增出从发病小熊猫分离的CDV的H和F基因,并将其克隆入到18T-simple载体上进行测序。使用Kpn I和Xho I限制性内切酶对重组载体进行双酶切并将目的基因克隆到pcDNA 3.1表达载体上,构建完成后转染293T细胞,转染48 h后,再利用RT-PCR和Western-blot检测目的基因的转录和目的蛋白的表达。结果表明,表达载体经转染后,在293T细胞中,目的基因均能得到转录而且正确表达 ...
张晓明 陈 武 彭仕明
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四川大学学报. 自然科学版, 2002 目的 构建人神经营养素 - 3(NT 3)的真核表达质粒 .方法 由于NT 3基因中无内含子 ,因此直接运用PCR技术从人基因组DNA中分离出人NT 3完整基因 ,与 pcDNA3.1(- )载体重组并测序 ,获得pcDNA NT3.用脂质体介导法将重组质粒转染人胚肾 2 93A细胞株 ,经G4 18筛选后 ,用RT PCR和免疫荧光法在转录和翻译两个水平上检测表达产物 .结果 测序证实所获得的是正确的重组质粒 .它的转录和翻译产物均可在细胞中检测到 .结论 成功地进行了NT 3的克隆与真核表达 ,NT
张伶俐 +3 more
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鉴定AP-4是在非激素依赖型前列腺癌中上调L-plastin表达的转录因子
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2006 【目的】鉴定AP-4是在非激素依赖型前列腺癌中调控L-plastin表达的转录因子，进一步阐明非激素依赖型前列腺癌的发病机制。【方法】在鉴定L-plastin启动子近3’端-216到1序列片段存在明显的转录活性的基础上，利用TFSEARCH软件分析该片段的序列，寻找可能调控L-plastin表达的非甾体激素类转录因子，并用凝胶滞后实验和超滞后实验证实结合于该片段的转录因子，利用PCR定点突变法构建删除该转录因子结合位点的重组子，并检测切除该片段序列后荧光素酶活性 ...
林天歆 +7 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2017 随着高通量测序、基因芯片等技术的兴起以及生物信息学的应用,大量的基因组转录本被揭示,从此众多的研究成果不断涌现,为揭示基因中的奥秘提供了新思路。研究发现[1],人类93%的基因组DNA可转录成RNA,编码蛋白的基因仅仅为人类基因组的2%[2],而其余98%则为不具有或具有极低蛋白质编码功能的非编码RNA（non-coding RNA,ncRNA）。成百上千个非编码RNAs被转录,并且被认为是具有不同大小、结构和生物功能的功能性RNA ...
孙延文, 印璞, 于庭
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2007 目的探讨PAI的发卡样siRNA真核表达载体PAI siRNA对人肝癌HpG2细胞VEGF表达的影响。方法设计短发夹状PAI siRNA的寡核苷酸链,将其插入到真核细胞表达载体pSilencerTM 2.1-U6 neo载体中,构建的重组载体后;采用脂质体转染方法将构建的重组载体导入人肝癌细胞HpG2中,采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）、westernblot法分别检测转染细胞PAI mRNA和蛋白的表达变化以及对VEGF表达的影响。结果经测序证明PAI siRNA序列正确;转染PAI ...
杜建时, 赵晴, 张静菊, 王嘉桔
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Mechanism of transforming growth factor-β1 induce renal fibrosis based on transcriptome sequencing analysis. [PDF]
Zhejiang Da Xue Xue Bao Yi Xue Ban, 2023 Li H +6 more
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重组pDC316-MCMV／hNIS真核表达质粒的构建及在肿瘤细胞的功能
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2007 【目的】克隆人的钠／碘同向转运体（hNIS）基因可编码序列，并研究其在非甲状腺肿瘤细胞内的功能表达。【方法】利用逆转录和聚合酶链反应（RT-PCR）从毒性弥漫性甲状腺肿（又称Graves病）病人的甲状腺组织中扩增得到NIS的可编码区基因，并克隆到T载体，测序后亚克隆到腺病毒载体穿梭质粒pDC316载体上，获得重组真核表达质粒载体pDC316-MCMV／hNIS。采用脂质体转染的方法，把pDC316-MCMV／hNIS重组质粒（实验组）或pDC316空质粒（对照组）分别导人到胰腺癌细胞株CAPAN-Ⅱ细胞、
周泉波 +5 more
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Linchuang shenzangbing zazhi, 2014 目的 构建重组人Orail基因真核表达载体,观察其在小鼠肾小球足细胞株（MPC5）中的表达。方法 根据GenBank数据库检索到的人Orail基因序列,人工合成法合成Orail基因编码区（coding sequence,CDS）全长序列,克隆至质粒表达载体PG-CMV-IRES-EGFP,构建重组质粒载体PG-CMV-Orail,通过PCR、双酶切及基因测序等方法进行鉴定;以脂质体转染法将重组质粒转染至MPC5细胞,应用荧光显微镜观察绿色荧光检测转染效率,RT-PCR、Western ...
魏冬月
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[Transcriptome sequencing for identification of the genes associated with restenosis of venous grafts in rabbits]. [PDF]
Nan Fang Yi Ke Da Xue Xue Bao, 2023 Zhou H, Yang L, Xie S, Yang J, Zhang J.
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