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Comparative transcriptome analysis on immunotoxic effect and mechanisms under different exposure time of EE2 on Oryzias melastigma [PDF]
, 2017 17α-炔雌醇（EE2）是一种广泛存在于海洋环境中的内分泌干扰物，具有多种毒性效应，影响鱼类的生殖生长和健康。EE2对鱼类生殖毒性效应方面的研究已有较多报道，但关于EE2免疫毒性机制的研究相对较少。本研究选择典型的内分泌干扰物EE2为受试物，以海洋模式动物海水青鳉（Oryziasmelastigma）为研究对象，采用RNA-seq测序技术构建了海水青鳉雄鱼肝脏转录组文库，以本实验室前期研究中克隆鉴定的抗菌肽（hepcidin）为目标免疫因子，选取表达变化最为显著的12h（OM-hep2上调）和48h ...
张梦飞
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MAPK信号通路蛋白在子宫内膜异位症诊治中的作用价值 附视频
Zhongguo shiyan zhenduanxue目的 探究临床子宫内膜异位症组及正常的子宫内膜组两者之间的差异性基因，寻找子宫内膜异位症诊断的新型标志物。方法 收集临床卵巢型子宫内膜异位症患者的囊肿组织8例及正常对照的子宫内膜6例行转录组测序，通过差异基因火山图、KEGG信号通路、GO富集分析，寻找差异基因及差异通路。选取测序有差异性的MAPK通路蛋白通过免疫组化验证及PCR验证。结果 转录组测序结果提示子宫内膜异位症组相较于正常组MAPK信号通路蛋白在子宫内膜异位症组，免疫组化及PCR结果显示MAPK6、MAPK10、MAPKBP1 ...
doaj +2 more sources
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2000 【目的】为探索共刺激分子 B7-1 增强 HBsAg 真核表达载体基因免疫的效果,并用于消除乙肝免疫耐受。【方法】 用高保真 PCR 法扩增目的基因片段 B7-1 及带接头和启动子的 IRES-HBs 基因片段,亚克隆到 pBluescript KS+载体中测序,再 克隆到逆转录病毒载体 PLXSN 中。【结果】所扩增的目的基因片段经测序证实, 未发现序列有改变。先将 B7-1 通过 EcoR Ⅰ 、Xho Ⅰ插入 plxsn 中,构建成 plxsn-B7-1, 再用 Xho Ⅰ 、 BamHⅠ将 ...
周 智 +4 more
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Changes of endogenous hormone concentrations and transcriptome analysis during the healing process of greenwood grafting in grape [PDF]
[Objective] To study the changes of hormone concentrations in the graft union during the healing process of greenwood grafting, the experiment was carried out, combined with transcriptomic data analysis, so as to identify the key hormone changes in the ...
CHEN Aisai +5 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2010 目的构建核转录因子κB抑制蛋白激酶（inhibitor of kappa B kinase,IKK）β真核表达载体,以便进一步探讨其生物学作用。方法从人正常肝细胞L02中提取RNA,并利用IKKβ特异性引物通过RT-PCR方法扩增了IKKβcD-NA,并克隆入pcDNA3载体中,构建重组载体pcDNA3-IKKβ。将重组载体转染入HEK293细胞中,并通过免疫印迹方法检测IKKβ的表达。结果酶切及测序结果显示,重组质粒构建成功;免疫印迹结果显示 ...
张冬梅 +6 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2022 ml或5 g,HRV定性检测采用酶联免疫吸附(ELISA)法,试剂为世界卫生组织(WHO)提供;G型、P型分型采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),引物序列及试验方法均由国家疾病预防控制中心(CDC)提供;HuCV、EAdV和HAstV用RT-PCR、PCR方法检测病毒核酸,引物序列及试验方法亦由国家CDC提供。1.3统计分析应用Excel2020统计软件进行数据整理及分析,计数资料用占比或率表示;应用SPSS 25.0进行卡方检验 ...
doaj
野生动物学报, 2023 为探究细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶8基因（CDK8）在马鹿（Cervus elaphus）鹿茸的皮、间充质、前软骨和软骨组织中的mRNA表达水平和该基因编码蛋白的生物学特性，采用PCR方法克隆马鹿CDK8基因编码区（CDS）全长序列，并连入pMD-18T载体，测得核苷酸序列，进行相似性比对和系统进化树构建；利用生物信息学方法分析CDK8蛋白的组成、结构和理化性质；利用实时荧光定量PCR技术检测CDK8基因mRNA在鹿茸组织中的表达水平。结果表明：马鹿CDK8的CDS全长1 254 bp ...
唐成怡 +4 more
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Study on HMW-PAHs metabolic pathway and transcriptional regulation in Novosphingobium pentaromativorans US6-1 [PDF]
, 2014 多环芳烃（PAHs）是一类在环境中广泛分布的有机化学污染物，具有“三致”（致癌、致畸、致突变）效应，通过食物链的传递会对生态环境和人体健康造成极大危害。目前研究结果表明，微生物的降解与转化是消除PAHs污染的有效方式之一。以苯并芘（BaP）为代表的高分子量PAHs（HMW-PAHs）因其结构稳定、难降解，可在环境中长期存在。能以BaP为唯一碳源和能源进行矿化的微生物研究报道较少，代谢路径也不够清楚。本论文以一株筛选自海洋环境的 ...
杨璐溪
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2001 【目的】构建人Ⅰ 型基质金属蛋白酶基因(MMP1)真核表达重组质粒, 并进行序列分析。【方法】用逆转录聚 合酶链反应扩增人Ⅰ 型基质金属胶原酶cDNA, 获得目的基因片段(1 407 bp)连接至pcDNA3 载体, 并转化大肠杆菌DH5α, 筛 选阳性克隆并鉴定, 并对片断全长进行DNA 序列测定。【结果】所克隆人Ⅰ 型基质金属胶原酶cDNA, 含全长MMP1 编码区, 与GeneBank 公布序列比较, 仅1 318 位的胞苷酸C 突变为腺苷酸A。并成功构建了含有MMP1 ...
彭 慧, 汪 谦, 黄洁夫
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2004 目的 构建人VEGF16 5腺病毒表达载体 ,探讨应用血管内皮生长因子 （VEGF）基因治疗脑梗死的可行性。方法 采用分子克隆技术 ,以质粒hVEGF16 5·SR为模板 ,扩增hVEGF16 5成熟cDNA。经穿梭质粒PShuttle克隆到腺病毒质粒上 ,构成Adeno VEGF16 5腺病毒重组质粒 ,经酶切及测序鉴定正确后 ,包装成为重组Adeno VEGF16 5腺病毒 ,并进行电镜观察及滴度测定。用免疫印迹及免疫组化方法检测VEGF蛋白的表达。结果 ...
张海鸥, 吴军, 林凯华, 易黎
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