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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1993 本文应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法,检测Ⅲ型登革病毒基因。所设计引物在E基因组,引物2位于核苷酸序列的1139～1158位,引物1位于1453～1471位,反应产物为333bp,内含1个HindⅢ限制性内切酶位点,酶切后有128 bp和199 bp两个片段。产物在含溴化乙锭的2％琼脂糖中电泳。采用RT-PCR法可测出少至5个半数组织细胞培养感染量(TCID_so)的病毒RNA。
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实时荧光定量RT-PCR检测siRNA表达载体抑制人肾癌786-0细胞G250 mRNA的表达
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2011 目的评价实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测小干扰RNA（siRNA）表达载体抑制人肾癌786-0细胞G250 mRNA表达的可靠性,以建立稳定的RNAi技术。方法体外合成四条针对G250基因的siRNA,并设计阴性对照和空白对照,转染肾癌786-0细胞株;根据G250 mRNA的序列设计特异性引物,荧光染料SYBR Green Ⅰ法定量RT-PCR测定G250 mRNA的表达情况。结果四条siRNA分别使G250 mRNA表达量降低了35.56%、49.27%、45.88%、65.13%
赵俊峰 +5 more
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野生动物学报, 2016 东北林蛙(Rana dybowskii)主要分布在我国东北部,季节性的低温环境使东北林蛙具有高效的抗冻策略,形成高浓度的葡萄糖保护剂是重要的抗冻机制之一。GLUT1是机体细胞中分布最广泛葡萄糖转运蛋白。本实验采用高通量测序技术获得东北林蛙GLUT1 mRNA片段,通过实时荧光定量PCR技术分析低温胁迫下(-1℃)东北林蛙随胁迫时间延长,其肝脏、骨骼肌、心脏、脂肪、皮肤组织中GLUT1转录水平的表达变化。结果发现,肝脏和心脏的GLUT1在低温胁迫24 h达到峰值,分别为对照组的9.17倍和5倍 ...
郭柏宏 肖向红 巩珊珊 张晶钰 柴龙会
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四川大学学报. 自然科学版, 2007 以成体牛蛙脑垂体总RNA为模板进行RT-PCR,克隆到牛蛙生长激素基因(bullfroggrowth hormone,bfGH)cDNA编码序列,其长度为651 bp,编码的前体GH蛋白序列经BLAST分析,与已报道的牛蛙GH蛋白质序列AAB24792、AAB19428、CAA31038的同源性分别为98.1%、96.3%、95.3%,其在Genbank的登录号为AY251538;将bfGH亚克隆到原核表达载体pGEX1-λt构建成牛蛙GH原核表达载体VGBfGH,转化BL21(DE3)E ...
张海英 +5 more
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[Application of RNA sequencing in clinical diagnosis of Mendelian disease]. [PDF]
Zhongguo Dang Dai Er Ke Za Zhi, 2020 Xiao H, Zhou WH.
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2004 【目的】研究小鼠胚胎干细胞源表皮样细胞分化过程中β1整合素(integrinβ1)表达情况与序列分析,为在分子水平上了解胚胎干细胞分化为表皮样干细胞时相关特异性蛋白表达量的变化打下基础。【方法】用双层培养板将小鼠胚胎干细胞与人羊膜共培养4～5d,显微镜下观察其形态分化,分别用免疫组化法和Actin内参照逆转录聚合酶链反应(reversetranscriptionpolymerasechainreaction,RT-PCR)定量检测β1整合素蛋白和mRNA的表达情况,并对RT-PCR产物进行测序 ...
张仁礼
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1997 摘 要 从广东省1例慢性丙型肝炎病人血清中提取HCV RN A,随机引物逆转录为cDN A后用HCV 5’ 端非编码区( 5’ NCR)特异引物进行聚合酶链反应( PC R)。扩增产物302 bp,经补齐和提纯后插入pUC 19质 粒,获得的重组质粒pUN采用双脱氧链终止法测定核苷酸序列,与国内外多个株比较,核苷酸同源性介乎 92.
李 刚 姚集鲁 彭文伟 王 斌 吕 凌
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[Single-cell RNA sequencing of B cells reveals molecular typing in Sjögren syndrome]. [PDF]
Beijing Da Xue Xue Bao Yi Xue BanLin W +6 more
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban缺血再灌注损伤（IRI）往往伴有严重的临床表现，包括心肌冬眠、急性心力衰竭、脑功能障碍、肾脏功能障碍、胃肠功能障碍、肝移植排斥反应，全身炎症反应综合征、多器官功能障碍综合征等，在临床上对医生提出了重要的治疗挑战。单细胞测序技术是在单细胞水平上对基因组、转录组或表观基因组进行高通量测序，从而揭示细胞的异质性，了解细胞的发育轨迹、类型、状态和各种相互作用。自首次发现以来，单细胞测序技术已经在各个领域都得到了广泛应用，尤其是肿瘤早期诊断和个性化治疗等 ...
张洁, 杨正飞
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[Progress of allergic rhinitis research based on transcriptome sequencing]. [PDF]
Lin Chuang Er Bi Yan Hou Tou Jing Wai Ke Za ZhiZhang H, Wang Y, Cheng F, An Y, Zhao C.
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