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pcDNA3.1-flag-pygo2真核表达载体的构建及在C6细胞中的表达
目的构建pcDNA3.1-flag-pygo2真核表达载体并在C6细胞中进行表达。方法从小鼠脑胶质细胞中提取总RNA,RT-PCR法反转录合成c DNA,设计引物,调取目的片段,与pcDNA3.1-flag载体连接后转化大肠杆菌DH5α,LB平板筛选菌落,提取质粒。重组质粒pcDNA 3.1-flag-pygo2经过酶切鉴定及测序后,阳离子脂质体法转染C6细胞并经免疫细胞化学染色及蛋白印迹检测重组体的表达。结果重构质粒pcDNA 3.1-flag-pygo2经限制性核酸内切酶EcoRⅠ ...
王海东 +5 more
doaj
Functional analysis of Gsc gene in amphioxus during early embryonic development [PDF]
文昌鱼是最接近脊椎动物直接祖先的现生动物,是研究脊椎动物发育相关基因功能演化的理想模型。转录因子Goosecoid(Gsc)为Homeobox基因家族重要成员,其mRNA特异表达在脊椎动物胚胎组织者(Organizer)、脊索前板(prechordalplate)等组织区域。在爪蟾中异位表达该基因可产生类似组织者的功能,诱导胚胎第二体轴的形成,该基因还可通过抑制Wnt、BMP等信号活性,参与脊椎动物背腹轴的形成和脑的发育 ...
商留珂
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Changes of endogenous hormone concentrations and transcriptome analysis during the healing process of greenwood grafting in grape [PDF]
[Objective] To study the changes of hormone concentrations in the graft union during the healing process of greenwood grafting, the experiment was carried out, combined with transcriptomic data analysis, so as to identify the key hormone changes in the ...
CHEN Aisai +5 more
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基于核糖体DNA第一与第二转录间隔序列以及5.8S序列,以分离自广州动物园大熊猫体内的蛔虫为研究对象,用保守引物NC5和NC2对核糖体DNA(rDNA)的内转录间隔区ITS-1,ITS-2及5.8S序列进行PCR扩增,扩增后的片段纯化后克隆至pGEM-Teasy载体,重组质粒通过菌液PCR鉴定后,对阳性菌落进行序列测定及分析,鉴定大熊猫蛔虫的种类。结果显示,目的片段总长为910 bp,2个不同样品之间的ITS及5.8S序列没有差异,与GenBankTM中的拜林蛔线虫(Baylisascaris ...
陈绚姣, 唐志玲, 陈武, 金超宇
doaj
[Application Progress of Dual RNA Sequencing in Microbial Research]. [PDF]
Xu MM, Sun YT, Chen H, Yang DQ.
europepmc +1 more source
Population genetic variation and symbiotic and associated bacteria diversity studies of bryozoan Bugula neritina based on high-throughput sequencing [PDF]
多室草苔虫是一种重要的药源生物,从这种生物体内提取出的多种草苔虫内酯被证明有着较强的抗癌活性,其中草苔虫内酯bryostatin1是治疗阿尔茨海默症和多种癌症的最有希望的药物来源,而草苔虫内酯bryostatin1的产生与多室草苔虫体内的共生细菌“CandidatusEndobugulasertula”密切相关。然而,国内学者从中国沿海的多室草苔虫中却一直未能成功提取出这种最具药用价值的草苔虫内酯bryostatin1 ...
李海
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传统动物转录组的研究主要是在器官或者组织水平上进行转录组测序,忽略了单个细胞在遗传方面的特殊性。scRNA-seq能够在单个细胞水平上揭示细胞内整体水平的基因表达状态和基因结构信息,帮助理解其基因型和表型之间的相互关系。本文主要就scRNA-seq技术的发展历史、在生物学研究中的作用、技术方法特点综述了现阶段在动物研究中的具体应用领域及具体案例,分析了其将来在动物及野生动物研究中更广泛应用前景,以期为动物的研究,特别是野生动物的研究提供方法指导。
赵敏蝶 +5 more
doaj
【目的】为探索共刺激分子 B7-1 增强 HBsAg 真核表达载体基因免疫的效果,并用于消除乙肝免疫耐受。【方法】 用高保真 PCR 法扩增目的基因片段 B7-1 及带接头和启动子的 IRES-HBs 基因片段,亚克隆到 pBluescript KS+载体中测序,再 克隆到逆转录病毒载体 PLXSN 中。【结果】所扩增的目的基因片段经测序证实, 未发现序列有改变。先将 B7-1 通过 EcoR Ⅰ 、Xho Ⅰ插入 plxsn 中,构建成 plxsn-B7-1, 再用 Xho Ⅰ 、 BamHⅠ将 ...
周 智 +4 more
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Single Nucleic Acid Molecule Manipulation and Single Cell Sequencing [PDF]
DNA既是遗传信息的载体,也具备识别、催化以及组装等功能。DNA双螺旋结构具有固定的宽度和螺距,这种特性使得DNA成为天然的“建筑”材料。通过合理的设计可利用DNA制造复杂的二维、三维纳米结构,以及各种结构可变的DNA分子机器。但是这些纳米结构和分子机器由于缺乏实际功能,无法真正应用于生物传感、药物运输、纳米器件等关键领域,发展功能性的纳米结构以及分子机器成为DNA纳米材料领域一个重要的发展方向。 严格的碱基互补配对原则为DNA的半保留复制和遗传信息的稳定传递提供了分子基础 ...
邹远
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目的构建核转录因子κB抑制蛋白激酶(inhibitor of kappa B kinase,IKK)β真核表达载体,以便进一步探讨其生物学作用。方法从人正常肝细胞L02中提取RNA,并利用IKKβ特异性引物通过RT-PCR方法扩增了IKKβcD-NA,并克隆入pcDNA3载体中,构建重组载体pcDNA3-IKKβ。将重组载体转染入HEK293细胞中,并通过免疫印迹方法检测IKKβ的表达。结果酶切及测序结果显示,重组质粒构建成功;免疫印迹结果显示 ...
张冬梅 +6 more
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