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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2007 目的构建Nogo受体基因干扰RNA表达载体,为促进中枢神经轴突的再生、探索临床治疗脊髓损伤新途径奠定基础。方法GeneBank中NgR的序列,应用www.invitrogen.com网站的设计软件设计、合成NgR miRNA的相应Oligo DNA,与BLOCK-iT Poll miR RNAi Expression Vector相连接,转化感受态Eco.li TOP10。结果限制性内切酶BamHⅠ和XhoⅠ酶切、测序鉴定重组载体BLOCK-iT Poll miR RNAi/NgR,显示NgR ...
王朝鲁, 孙红辉, 杨有庚
doaj
The Effects and Mechanisms of JMJD1A on Colorectal Tumorigenesis [PDF]
, 2015 结直肠癌（colorectalcancer，CRC）是当今世界高发恶性肿瘤之一，多数由散发腺瘤阶段性发展而来，少数结肠癌的发生呈家族性聚集现象或由炎性肠病诱导发生。对结肠癌的早期筛查与诊断是结肠癌防治重点，由于结肠癌患者个体间差异性大，对靶向药物的开发是未来结肠癌治疗的重要辅助手段。 组蛋白去甲基化酶JMJD1A(Jumonjidomaincontaining1A)通过羟基化作用使组蛋白赖氨酸去甲基进而行使转录调节功能，参与精子生成、能量代谢、干细胞更新调控，也参与低氧诱导下的肿瘤调控 ...
苗萌萌
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2014 目的探讨RNA干扰技术沉默胰岛素生长因子结合蛋白2（IGFBP-2）对胶质瘤细胞株U251增殖、凋亡的影响,为胶质瘤的基因治疗提供一个可选择的靶点和方法。方法构建靶向IGFBP-2基因的RNAi表达载体;采用脂质体法将siRNA转染U251细胞,设非特异的siRNA阴性对照组和未转染siRNA的阴性对照组;采用RT-PCR法半定量检测siRNA对IGFBP-2基因表达的抑制作用;用MTT法测定U251细胞增殖变化;流式细胞术检测siRNA诱导细胞凋亡作用。结果构建的RNAi表达载体抑制了IGFBP ...
许淑芬 +6 more
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siRNA介导的ADAM17基因沉默对前列癌PC3细胞增殖和凋亡的影响
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2020 目的探究RNA干扰靶向沉默ADAM17基因对前列腺癌PC3细胞增殖和凋亡的影响。方法构建针对ADAM17的小干扰RNA(siRNA)表达质粒PGC-siADAM17,脂质法稳定转染PC3细胞,采用逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)检测转染细胞ADAM17 mRNA的基因表达,噻唑蓝(MTT)法测定瘤细胞增值率,原位未端标记(TUNEL)法检测瘤细胞凋亡率,流式细胞术(FCM)检测瘤细胞周期比例。结果 PGC-si ADAM17使PC3细胞ADAM17蛋白分泌水平下调,对PC3细胞增殖的抑制率为53.6%
李雪 +5 more
doaj
The clone, prokaryotic expression of cry2Ab30 gene and its insecticidal mechanism against Plutella xylostella L. [PDF]
, 2015 Cry毒素是苏云金芽胞杆菌（Bt）产生的δ内毒素之一，其特征是对多种农业害虫均具有杀虫毒性，被广泛应用于微生物农药及转基因植物中。 本研究以福建省农科院分离保存的高毒力Bt菌株FJAT-12为模板，克隆得到一个新的cry2Ab基因，多序列比对结果显示该cry2Ab基因有2个保守性位点发生突变，为第四类新基因，并被命名为cry2Ab30。构建pET30a-cry2Ab30原核表达载体，表达Cry2Ab30蛋白并利用WesternBlot进行验证；分别从诱导剂IPTG浓度 ...
许炼
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siRNA对骨肉瘤U2OS细胞株MDM2-mRNA表达的抑制作用
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2007 目的研究载体介导的siRNA（small interfere RNA）技术对骨肉瘤细胞株U2OS中MDM2-mRNA表达的抑制作用。方法依据设计siRNA的原则,以MDM2为靶基因设计并合成有小发夹结构的两条DNA序列,经退火成互补双链,再克隆到载体PGCsilencerTM中构建重组体（PGCsilencerTM-MDM2 siRNA）。实验分转染重组质粒组,转染阴性对照质粒组和只加脂质体的空白组;RT-PCR法观察U2OS细胞中MDM2-mRNA表达改变 ...
吕佳音 +5 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2020 目的探究GATA2/GATA6调控胃癌自噬和凋亡的机制。方法以人胃癌SGC-7901细胞为研究对象,建立干扰RNA转染模型,通过流式细胞术检测细胞周期改变,Annexin-V-FITC/PI双染检测细胞凋亡,倒置相差显微镜、透射电镜观察细胞形态,并应用MDC染色对细胞自噬进行测定。结果 GATA2与GATA6表达量与肿瘤直径、淋巴结转移呈正相关,肿瘤直径小于2cm的组织中GATA2与GATA6表达水平显著低于肿瘤直径大于2cm的组织 ...
洪森, 李世权, 刘涛, 康振华
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Functional analysis of Hedgehog gene in amphioxus embryogenesis and mutants construction related to the Hedgehog signaling pathway [PDF]
, 2015 Hedgehog（Hh）基因在动物胚胎发育过程中有着重要的作用，该基因最早在果蝇中发现，参与果蝇分节极性（segmentpolarity）的形成及翅原基前后组织中心的建立；在海胆中，参与中胚层的分化；而在脊椎动物中，该基因主要参与中枢神经系统（CNS）、轴旁中胚层及附肢的发育。在头索动物文昌鱼中，前人基于Hh的表达谱分析，推测该基因参与神经管的发育及左右轴的建立，提出Hh对神经管腹侧神经元分化的作用可能是一原始特征。 本文用基因敲低、过表达和敲除3种方法对文昌鱼Hh基因在胚胎发育中的功能做了进一步研究 ...
王慧
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实时荧光定量RT-PCR技术检测siRNA对HBV复制的干扰效果
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2007 目的运用实时荧光定量RT-PCR的方法,检测小RNA分子（small interfering RNAs,siRNA）对乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）复制的抑制作用。方法在HepG2.2.15细胞内导入筛选的三条特异抗HBV的siRNA分子,用实时荧光定量RT-PCR的方法,检测干扰后HBV的mRNA表达水平。结果导入特异siRNA分子的细胞中HBV的mRNA表达量明显降低。结论实时荧光定量RT-PCR技术能准确可靠的检测mRNA的表达水平 ...
陈小卫, 焦京, 周美娟, 丁振华
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Studies on the Function of Genes Related to Zinc Accumulation of the Fujian Oyster Crassostrea angulata [PDF]
, 2015 牡蛎是我国重要的经济贝类，具有很高的营养价值和保健价值，牡蛎富含人体所需多种微量元素，尤其是锌含量十分丰富。牡蛎同一群体的不同个体间的锌含量有很大差别，但其分子机制迄今尚未阐明。本文研究了福建牡蛎（Crassostreaangulata）几种锌富集相关基因与锌富集的关系，研究结果可为解析牡蛎对锌的高富集及个体富集差异的分子机制提供新资料。主要研究结果如下： 1、利用cDNA末端快速扩增技术（rapid-amplicationofcDNAends，RACE）扩增福建牡蛎锌富集相关基因cDNA全长 ...
向旭
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