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使用FLAG标签肽及慢病毒载体共同筛选小鼠foxp3基因RNA干扰的有效靶点
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2007 【目的】筛选高效的foxp3 RNA干扰的靶点用于阻断CD4^＋CD25^＋ Treg细胞的免疫抑制功能。【方法】使用oligoengine软件设计foxp3基因shRNA序列，化学合成法合成4条shRNA序列，构建含foxp3的靶序列的慢病毒载体：构建出表达FLAG融合蛋白和目的基因的工具细胞293T细胞用于筛选RNA干扰的有效靶点。【结果】成功包装了4条foxp3基因靶序列相应的慢病毒颗粒；成功构建了表达融合蛋白和目的基因的293T工具细胞：在工具细胞上筛选出了2条RNAi效率分别为91.3％和95．
史艳侠 +5 more
doaj
The mechanism and function of extracellular matrix protein Mindin in the colon cancer progression [PDF]
, 2015 在世界范围内，结直肠癌是临床上常见的恶性肿瘤之一。结肠癌的发病机制也在不断细致、深入的研究。然而结肠癌这种实体肿瘤不像单纯的肠癌细胞系。相反，它是由多种类型的细胞和细胞外基质组成的功能失调的器官。细胞外基质是肿瘤微环境的重要组成部分，包含各种各样的细胞因子和代谢产物，具有向细胞传导各种环境信号的作用。这些信号对于细胞生命过程的方方面面都必不可少，包括增殖、分化和死亡等。然而，细胞外基质蛋白在结肠癌发生发展的演变过程中的作用尚未完全明确。 分泌型的细胞外基质蛋白Mindin作为Mindin-F ...
肖传兴
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RNA干扰Ku70基因对宫颈癌Hela细胞放射敏感性影响的实验研究
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2010 目的观察ku70基因短干扰RNA（siRNA）对宫颈癌Hela细胞放射敏感性的影响。方法采用集落形成技术测定不同剂量射线照射对Hela细胞存活率的影响,观察Hela细胞对射线照射的敏感性。采用时定量PCR技术（quantitiv real time PCR,QRT-PCR）检测Ku70 mRNA水平表达。采用Western Blot免疫印记技术检测Ku70蛋白表达。采用RNA干扰（RNAi）技术抑制Hela细胞中Ku70蛋白的表达,观察Ku70蛋白表达下调对Hela细胞放射敏感性的影响 ...
张妍, 尹元
doaj
A preliminary study of four histone deacetylase genes in Caenorhabditis elegans [PDF]
, 2016 秀丽隐杆线虫（Caenorhabditiselegans，C.elegans）作为发育生物学的模式生物，广泛用于神经系统和药物筛选方面的研究。秀丽隐杆线虫与人类和寄生虫的很多基因存在同源性，利用它的这一生物特点，可以建立与人类疾病相关基因的研究模型，研究相应的信号通路，发现新的具有重要生物功能的潜在药物靶标。 组蛋白去乙酰化酶（histonedeacetylases，HDACs）催化组蛋白的去乙酰化，可抑制基因的转录。在哺乳动物中发现了4类HDACs，它们参与了癌症相关基因的转录表达 ...
郑冬林
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2009 目的构建靶向人SSH1L的siRNA真核表达载体（pSUPER-SSH1L）。方法将设计好的SSH1L的siRNA的寡聚脱氧核苷酸链与真核表达载体pSUPER连接,构建重组pSUPER-SSH1L真核表达载体。对该重组表达载体进行酶切鉴定及DNA测序;通过Western blot检测SSH1L蛋白的表达。结果酶切鉴定、DNA测序以及Western blot检测结果证实表达质粒构建成功,无碱基突变。结论成功构建了靶向人SSH1L基因表达的siRNA干扰质粒载体pSUPER-SSH1L ...
邢志军, 赵建武, 王岩, 高忠礼
doaj
Molecular mechanisms of cell death induced by matrine in human cholangiocarcinoma Cells [PDF]
, 2016 胆管癌是起源于胆管上皮的一种恶性肿瘤，在我国发病率和死亡率逐年上升。而胆管癌细胞抵抗凋亡是导致胆管癌化疗失败的重要原因，所以研发能够诱导胆管癌细胞以不发生凋亡的死亡新途径的化疗药显得十分重要。苦参碱具有多途径、多种机制的抗肿瘤活性，已经证实能够诱导多种肿瘤细胞死亡，但是在胆管癌中的生物学作用和潜在机制却鲜有报道。程序性坏死(necroptosis)是可被调控的程序性细胞死亡，在形态学上具有典型的坏死样形态改变，依赖于受体相互作用蛋白1和3，此外，可被程序性坏死的特异性抑制剂Nec-1所阻断 ...
徐贝贝
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The clone, prokaryotic expression of cry2Ab30 gene and its insecticidal mechanism against Plutella xylostella L. [PDF]
, 2015 Cry毒素是苏云金芽胞杆菌（Bt）产生的δ内毒素之一，其特征是对多种农业害虫均具有杀虫毒性，被广泛应用于微生物农药及转基因植物中。 本研究以福建省农科院分离保存的高毒力Bt菌株FJAT-12为模板，克隆得到一个新的cry2Ab基因，多序列比对结果显示该cry2Ab基因有2个保守性位点发生突变，为第四类新基因，并被命名为cry2Ab30。构建pET30a-cry2Ab30原核表达载体，表达Cry2Ab30蛋白并利用WesternBlot进行验证；分别从诱导剂IPTG浓度 ...
许炼
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2009 目的采用RNA干扰技术抑制树突状细胞（DCs）SOCS1的表达,并检测其对树突状细胞抗肿瘤活性的影响,为树突状细胞的临床应用奠定基础。方法针对SOCS1基因,采用化学合成法合成3对SOCS1 siRNA,并转染树突状细胞。Western blot检测树突状细胞SOCS1的表达情况,筛选出有效的siRNA序列,MTT法测定SOCS1沉默的树突状细胞抗肿瘤活性的变化。结果与空白对照组相比,序列3组SOCS1蛋白质表达水平明显降低;SOCS1沉默的树突状细胞抗肿瘤活性显著提高 ...
于鸿, 张健, 刘玉侠
doaj
The association between the antioxidant property and ROS system in murine corneal epithelial progenitor cells [PDF]
, 2016 目的：活性氧（ROS）是体内产生的一种高活性分子，低浓度可以调节细胞代谢，基因转录和磷酸酶的活性，高浓度则会导致氧化损伤。目前，有关干细胞自身特性的研究越来越受到学者们的重视，但既往文献中关于干细胞对氧化应激反应以及应激条件下细胞内相关酶活性的变化规律却很少报道。本课题聚焦于，在过氧化氢（H2O2）诱导的氧化应激条件下，活性氧生成关键因子NOX4和抗氧化酶核转录因子NRF2在小鼠角膜上皮祖细胞（TKE2）和成熟的小鼠角膜上皮细胞（MCE）中的不同作用及相关机制。 方法：利用小鼠角膜上皮祖细胞（TKE2 ...
周晶
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沉默FRAT1基因对结肠癌HT-29细胞增殖与凋亡的影响及其机制研究
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2014 目的探讨沉默FRAT1基因对结肠癌HT-29细胞增殖、凋亡的影响及其可能分子机制。方法将成功转染FRAT1基因RNA干扰序列的人结肠癌HT-29细胞扩大培养,MTT比色法检测细胞增殖,双染流式细胞术检测细胞凋亡率,单染流式细胞术分析细胞周期,免疫荧光法激光共聚焦显微镜下观察β-catenin蛋白变化。结果转染组细胞较对照组细胞生长明显减缓 ...
王苏雅 +5 more
doaj