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Construction of Recombinant Plasmid for Yeast Ethanolic Xylose-Fermentation [PDF]
, 2009 燃料乙醇是公认的最有发展前景的可再生清洁能源之一。木质纤维素是地球上最充分的有机资源，以木质纤维素类生物质生产燃料乙醇不仅能够降低燃料乙醇生产的原料成本，同时在废物处理、环境保护等方面起到一定的作用。木糖发酵是植物纤维原料生物转化制取乙醇商业化生产的基础和关键，但自然界存在的微生物菌株不能满足商业化生产的需要。利用基因工程技术对酵母菌进行改造，以提高它们的木糖发酵能力成为目前研究和开发的重点。 采用oligo和Primerpremier5软件设计引物，从休哈塔假丝酵母中克隆到木糖还原酶基因xyl1 ...
黄丽春
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鼠白细胞介素-2 受体 α 、β链基因反义 RNA 真核表达质粒的构建
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2000 【目的】构建鼠 IL-2R α与β 链基因的反义 RNA 真核表达质粒, 为反义 RNA 基因治疗细胞免疫相关疾病作准备。 【方法】用限制性内切酶从克隆载体上切下鼠 IL-2R α与β 链cDNA 及鼠 IL-2启动子, 克隆入真核表达质粒 pcDNA3 的多克隆 位点上,用酶切或 PCR 法鉴定正反连接。【结果】得到 4 个反向连接的重组质粒: pcAnti-mIL-2Rα , pcAnti-mIL-2Rβ ,pcAntim IL-2Rα β 及 pciAnti-mIL-2Rα β 。前三者由CMV ...
何承伟, 马涧泉
doaj
The microbial characteristics of nitrite transformation and diversity changes of microbial community in Litopenaeus vannamei aquaculture [PDF]
, 2017 水产养殖环境是一个具有丰富氮（N）源的N循环系统，而亚硝酸盐（NO2-）是一种存在于养殖水体的毒性物质，过量的NO2-会毒害养殖动物，甚至危害人体健康。养殖水体中亚硝酸盐是如何积累以及如何快速去除，一直是人们关注的热点，也是健康养殖的重点。因此，为了解不同养殖时期水体中参与亚硝酸盐积累与转化的微生物过程，以及细菌菌群动态变化规律及其与水质参数的相互关系。本研究以凡纳滨对虾养殖水体为研究对象，通过功能基因克隆文库和qPCR技术分析养殖水体中参与亚硝酸盐转化的功能基因多样性和丰度 ...
胡东
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LncRNA FOXD2-AS1对胶质瘤细胞增殖及迁移能力的影响
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2019 目的研究lncRNA FOXD2-AS1对胶质瘤细胞增殖及迁移的作用。方法利用脂质体转染小干扰RNA以沉默lncRNA FOXD2-AS1基因,通过MTT、平板克隆形成实验和transwell小室等实验方法检测胶质瘤细胞的增殖及迁移。结果对照组在96h增殖率为19.8%±1.09%、20.3%±1.12%,沉默lncRNA FOXD2-AS1基因后的增殖率为7.59%±0.615%、17.9%±0.720%,差异有统计学意义。对照组的克隆形成数为119.3±11.0、162.3±50.2 ...
上官文兵 +3 more
doaj
Research on Roles of Nucleophosmin in Human Osteosarcoma Cells [PDF]
, 2016 Nucleophosmin作为重要的核仁磷酸化蛋白，在细胞的生命活动过程中发挥多种功能，并在多种肿瘤细胞中发生表达与细胞定位的变化。为探究Nucleophosmin在人成骨肉瘤细胞MG63中的功能作用与分子机制，本论文在成功制备Nucleophosmin兔多克隆抗体的基础上，通过构建正常定位以及胞质定位的Nucleophosmin表达载体，结合免疫共沉淀（Co-IP）、GST-pulldown、免疫荧光共定位、免疫亲和纯化和液相色谱-串联质谱联用技术（LC-MS/MS ...
石静娴
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2008 【目的】 FAM3A (family with sequence similarity 3, member A)为新近发现的细胞因子FAM3的家族成员之一,本研究检测FAM3A的相互作用蛋白? 【方法】 克隆FAM3A并连接到pGB载体,转化酵母Y190宿主菌,加入含主要信号传导细胞因子人cDNA文库,按标准程序进行酵母双杂交,以X-Gal显色评估活性?提取扩增阳性克隆,连接pACT2载体,测序?检索基因库确定阳性克隆基因?克隆阳性基因并与FAM3A质粒共转染酵母进一步确定相互作用?
doaj
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2007 目的检测DHA-1型质粒AmpC酶诱导性耐药调控因子AmpR基因。方法以我院临床分离产DHA-1型质粒AmpC酶的4株大肠埃希菌和10株肺炎克雷伯菌为研究对象,采用聚合酶链反应（PCR）,用特异性引物扩增Am-pR调节因子全编码基因,并将一株肺炎克雷伯菌AmpR基因克隆到pET-22b（+）载体质粒中测序。结果所有实验菌株AmpR基因检测阳性,重组子AmpR基因测序表明与摩根摩根菌染色体上AmpR基因同源性达99.8%。结论产DHA-1型质粒AmpC酶肺炎克雷伯菌 ...
多丽波, 栾英, 张联博, 李垚
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2001 【目的】构建反义c-myb 重组逆转录病毒载体并建立其包装细胞株。【方法】采用RT-PCR 方法, 获取目的基因, 通过TA 克隆方法克隆入pUC19, 再反向亚克隆入逆转录病毒载体pDOR 中。采用DOTAP 法将重组逆转录病毒载体转入包 装细胞, 以NIH3T3 细胞为靶细胞测定产病毒滴度。【结果】序列测定结果与GenBank 中序列一致。c-myb 基因片段已定向 克隆入pDOR。细胞转染表明, 已形成稳定的包装细胞株PA317/ pDOR-my b, 产病毒滴度达5.2 ×104 ～ 9 ...
马会慧 +5 more
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野生动物学报, 2015 根据Gen Bank中发表的犬瘟热病毒(CDV)的基因组序列设计了H和F基因的2对引物,通过RT-PCR扩增出从发病小熊猫分离的CDV的H和F基因,并将其克隆入到18T-simple载体上进行测序。使用Kpn I和Xho I限制性内切酶对重组载体进行双酶切并将目的基因克隆到pcDNA 3.1表达载体上,构建完成后转染293T细胞,转染48 h后,再利用RT-PCR和Western-blot检测目的基因的转录和目的蛋白的表达。结果表明,表达载体经转染后,在293T细胞中,目的基因均能得到转录而且正确表达 ...
张晓明 陈 武 彭仕明
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[PINK1 suppresses colorectal cancer cell growth through epigenetic regulation of histone modifications]. [PDF]
Zhejiang Da Xue Xue Bao Yi Xue BanWang M, Luan S, Fan X, Han D, Zhu Y.
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