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Over-expression of Xylose isomerase/Xylulokinase and Construction of O2-tolerant hydrogenase in Klebsiella oxytoca HP1 [PDF]
在石化燃料枯竭和全球气候变暖的双重危机下,氢气作为一种可再生、零排放和高热值的清洁能源载体而备受关注。关于氢能的研究主要围绕氢的制取和氢的利用两个方面展开。在众多制氢方式中,生物制氢因其生产成本低、原料来源丰富和环境污染小,从而成为制氢研究的热点。在氢的利用中,燃料电池技术一直以来都是研究的重点。氢酶是一种含金属的氧化还原酶,其广泛存在于微生物中,能够可逆地催化H+的还原和H2的氧化(2H++2e-↔H2)。无论是在氢的制取还是氢的利用中,氢酶都是氢能技术的核心之一 ...
黄钢锋
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从两例萄糖一6一磷酸脱氢酶变异型——台湾客家型[Gd(-)Taiwan-Hakka]患者基因组DNA中,回收经EcORⅠ完全酶解的3~5 kb片段,与载体λgt10插入重组,用SMR10单菌种系统制备包装提取物,对重组的λgt10进行体外包装,构建成两个基因组基因文库。用32P中标记的G6 PDcDNA成功地从文库中初选出12个阳性克隆,挑选其中4个阳性克隆再次杂交予以证实,提取其中2个克隆DNA,经限制酸酶切电泳及斑点杂交鉴定,分离到该变异型基因的插入片段,并将其克隆到M13 mP19噬菌体,完成Gd(
doaj
A preliminary study of four histone deacetylase genes in Caenorhabditis elegans [PDF]
秀丽隐杆线虫(Caenorhabditiselegans,C.elegans)作为发育生物学的模式生物,广泛用于神经系统和药物筛选方面的研究。秀丽隐杆线虫与人类和寄生虫的很多基因存在同源性,利用它的这一生物特点,可以建立与人类疾病相关基因的研究模型,研究相应的信号通路,发现新的具有重要生物功能的潜在药物靶标。 组蛋白去乙酰化酶(histonedeacetylases,HDACs)催化组蛋白的去乙酰化,可抑制基因的转录。在哺乳动物中发现了4类HDACs,它们参与了癌症相关基因的转录表达 ...
郑冬林
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Enzymology, Gene Cloning and Proteomics of Aspergillus glaucus XC9 [PDF]
本研究从灰绿曲霉发酵液中分离纯化出一种外切葡聚糖酶(CBH)和一种内切葡聚糖酶(EG)。SephadexG-100凝胶柱层析和SDS-PAGE测得CBH全酶分子量为71kDa,由两个35kDa亚基组成;EG为单体蛋白,全酶分子量为32kDa。CBH催化pNPC的最适pH为6.0,最适温度为55oC,Km值为1.4mmol/L,酶活在pH5.0~8.0区间和温度低于55oC时稳定;EG催化CMC-Na的最适pH为4.0,最适温度为50oC,Km值为5.0mg/mL,酶活在pH3.5~7 ...
陶毅明
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Entry and Molecular Regulation of White Spot Syndrome Virus (WSSV) into Crayfish Hpt cell [PDF]
白斑综合征病毒(Whitespotsyndromevirus,WSSV)是对虾的主要病原,该病毒致死率高、传染性强、宿主范围广,是水生甲壳类动物中最为严重的病毒性病原之一。因此,加深对WSSV感染致病机理的理解,寻找高效抗病毒防治方法,意义重大。培养细胞是病毒感染研究的有力工具,在甲壳动物原代细胞培养研究中,螯虾造血组织干细胞(Haematopoietictissuestemcell,Hptcell)—Hpt细胞培养较为稳定,是WSSV感染研究的首选。本研究以红螯螯虾 ...
陈荣元
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T24膀胱癌细胞ARID1A基因的表达与细胞增殖活力相关性研究
目的探讨AT丰富结合域1A(ARID1A)基因的表达与膀胱癌细胞T24增殖活力的关系,为进一步基因功能研究提供基础。方法利用梯度稀释法分离获得膀胱移行癌细胞系T24的高增殖亚克隆细胞株,体外评价细胞株和亲代细胞系增殖活力差异,检测细胞周期调控基因CCND1和膀胱癌肿瘤干细胞标志因子CD44。检测染色质重建复合物SWI/SNF亚基基因ARID1A在亚克隆和亲代细胞系的转录表达水平差异。结果分离得到65个T24的亚克隆细胞株,其中T24-9亚克隆细胞株不同于亲代的梭形形态,呈细小的圆形形态 ...
吴金斌 +4 more
doaj
Structural and mechanistical studies of the nuclear import of KAT8 by importin α [PDF]
作为真核细胞的显著特征,核膜包裹的细胞核将核内的遗传物质和转录单元与细胞质内的翻译单元和代谢单元分割了开来,这种分割方便了细胞对包括基因表达、信号传导和细胞周期等众多细胞生理活动的调控。特定组分在细胞质和细胞核间的选择性双向运输就是这种调控的一项关键特征,大分子货物蛋白从细胞质向细胞核定向运输需要货物蛋白的核定位信号NLS、识别并结合NLS的接头蛋白细胞核输入蛋白IMPα及载体分子细胞核输入蛋白IMPβ三方的协调作用 ...
王瑞
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根据GenBank上已发表的H6N2亚型的非结构蛋白基因(NS)序列,设计一对特异性引物,成功从本实验室分离、保存的H6N2禽流感病毒分离株A/Mallard/SanJiang/151/06(H6N2)中克隆到NS基因序列。该克隆基因全长860bp,编码NS1和NS2两种非结构蛋白,与其他H6N2亚型的NS基因进行同源性比较,同源性为71.1%~97.2%,推导的氨基酸序列同源性为62.0%~94.6%。
张智明, 李晓冰, 华育平
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Studies on Cloning and Transformation of Gibberellin Receptor Gene in Arabidopsis [PDF]
目前已发现的调控植物开花过程的分子遗传学途径主要有四个:春化途径、光周期途径、自主开花途径与赤霉素途径。赤霉素信号转导途径控制着一系列的生长发育过程,调控开花时间是其重要功能之一。目前已有相关报道表明各个信号转导途径间可能存在复杂的对话机制,进而影响植物的发育与开花时间。为了进一步研究赤霉素信号转导与其它开花途径之间的相互作用及对开花时间的影响,我们克隆了赤霉素三个受体基因,并构建了与HA融合的超表达载体。本研究得到的转基因材料为进一步研究拟南芥中赤霉素信号转导途径与其它信号途径间的对话机制提供了基础 ...
刘艳芳
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目的研制高效表达型T载体用于基因的表达及蛋白功能分析。方法限制性内切酶EcoR V酶切真核表达载体pcDNA3,回收线性化质粒片段与三磷酸胸腺嘧啶脱氧核苷酸(dTTP)70℃退火,构成T克隆载体并回收纯化。将增强绿色荧光蛋白基因(EGFP)和中国旱獭α干扰素基因(cwIFNA5)分别扩增后直接克隆到新构建的表达型T载体,转化感受态细菌,挑选阳性菌并制备质粒瞬时转染真核细胞,荧光显微镜观察EGFP的表达,病毒保护试验检测中国旱獭α干扰素的生物学活性。结果成功构建了表达型T载体 ...
卢银平, 祝建芳, 刘朝, 董继华
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