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鼠白细胞介素-2 受体 α 、β链基因反义 RNA 真核表达质粒的构建
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2000 【目的】构建鼠 IL-2R α与β 链基因的反义 RNA 真核表达质粒, 为反义 RNA 基因治疗细胞免疫相关疾病作准备。 【方法】用限制性内切酶从克隆载体上切下鼠 IL-2R α与β 链cDNA 及鼠 IL-2启动子, 克隆入真核表达质粒 pcDNA3 的多克隆 位点上,用酶切或 PCR 法鉴定正反连接。【结果】得到 4 个反向连接的重组质粒: pcAnti-mIL-2Rα , pcAnti-mIL-2Rβ ,pcAntim IL-2Rα β 及 pciAnti-mIL-2Rα β 。前三者由CMV ...
何承伟, 马涧泉
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小鼠<italic>BRI3</italic>基因的克隆及其诱导细胞死亡的作用 [PDF]
, 2001 寿元 赵 +6 more
openalex +1 more source
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2008 【目的】 FAM3A (family with sequence similarity 3, member A)为新近发现的细胞因子FAM3的家族成员之一,本研究检测FAM3A的相互作用蛋白? 【方法】 克隆FAM3A并连接到pGB载体,转化酵母Y190宿主菌,加入含主要信号传导细胞因子人cDNA文库,按标准程序进行酵母双杂交,以X-Gal显色评估活性?提取扩增阳性克隆,连接pACT2载体,测序?检索基因库确定阳性克隆基因?克隆阳性基因并与FAM3A质粒共转染酵母进一步确定相互作用?
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2001 【目的】构建反义c-myb 重组逆转录病毒载体并建立其包装细胞株。【方法】采用RT-PCR 方法, 获取目的基因, 通过TA 克隆方法克隆入pUC19, 再反向亚克隆入逆转录病毒载体pDOR 中。采用DOTAP 法将重组逆转录病毒载体转入包 装细胞, 以NIH3T3 细胞为靶细胞测定产病毒滴度。【结果】序列测定结果与GenBank 中序列一致。c-myb 基因片段已定向 克隆入pDOR。细胞转染表明, 已形成稳定的包装细胞株PA317/ pDOR-my b, 产病毒滴度达5.2 ×104 ～ 9 ...
马会慧 +5 more
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人类Foxm1b基因的原核表达、抗体制备及其对肝癌细胞中Foxm1b蛋白的识别
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2007 【目的】构建人类Foxm1b基因的原核表达载体，表达并纯化蛋白，制备多克隆抗体，并用此抗体检测肝癌细胞中Foxm1b基因的表达，为进一步研究Foxm1b基因的功能奠定基础。【方法】从GenBank中下载人类Foxm1b基因全长cDNA序列并用Pegene软件分析其可能的抗原表位，设计引物．应用RT—PCR获得含抗原表位的Foxm1b基因片段，重组人原核表达载体pET-28a，在大肠杆菌BL-21（DE31中诱导表达，应用亲和层析法获得纯度较高的原核表达蛋白并免疫大鼠制备多克隆抗体 ...
唐保东 +4 more
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2001 【目的】克隆人血管内皮生长因子165 基因, 并测定蛋白质的表达及鉴定其活性。【方法】用PCR 法从人心脏 cDNA 文库中钓取目的基因VEGF165 , 插入质粒PUC19 中并测序鉴定。构建真核表达重组质粒AdtrackCMV-VEGF165 转染 293 细胞, 用RNA 斑点杂交和Wester n blot 方法检测VEGF165 基因表达, 并通过Miles 试验检测VEGF165 蛋白活性。【结 果】PCR 产物为582 bp , 测序结果表明其序列正确, 在RNA ...
李子俊, 余细勇
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