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The protective function of Connexin43 on adipose derived stem cell when exposed to tert-butyl hydroperoxide induced injury [PDF]

open access: yes, 2012
背景及目的:通过基因修饰的方法实现对干细胞生物学特性的改造,是保证移植细胞存活及增殖能力的重要手段,也是减少干细胞移植相关心律失常事件的重要手段。既往的研究证实通过上调Cx43的表达,可产生抗心律失常作用。本研究将明确Cx43基因转导ADSC可否提高T-booh损伤后ADSC细胞的存活率 方法:构建Connexin43和GFP双基因共表达的重组慢病毒载体质粒,脂质体转染法包装产生慢病毒颗粒。携带目的基因病毒颗粒感染ADSCs构建工程干细胞,运用流式细胞仪、荧光显微镜、Westernblotting、RT-
陈晓敏
core  

pAdKDR/CD/TK双自杀基因系统对肝癌细胞的杀伤作用的试验研究

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2017
目的探讨含KDR启动子的双自杀基因CD/TK对肝癌HepG2细胞的杀伤作用。方法观察不同前药对HepG2细胞、血管内皮细胞ECV304和LST174细胞的杀伤作用,评估KDR启动子的靶向杀伤作用。观察不同前药对转染不同自杀基因的HepG2细胞的杀伤作用,及旁观者效应。结果转染腺病毒的HepG2细胞及血管内皮ECV304细胞对前药具有较高的敏感性,而感染腺病毒的LST174细胞对前药不敏感 ...
谷洋   +4 more
doaj  

hTERT启动子调控的TRAIL基因对乳腺癌细胞株的杀伤作用

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2009
目的探讨hTERT、CMV启动子调控下TRAIL基因对乳腺癌细胞的生长抑制作用。方法脂质体法将pACCMV-EGFP-TRAIL、pAChTRET-EGFP-TRAIL转染至乳腺癌细胞MDA-MB-435,MTT法检测转染前后乳腺癌细胞的增殖变化,流式细胞术检测细胞凋亡变化。结果pACCMV-EGFP-TRAIL转染组和pAChTRET-EGFP-TRAIL转染组OD490值明显低于空白对照组和空质粒转染组,流式细胞术检测细胞凋亡率也明显增高,并且pAChTRET-EGFP ...
刁建东, 卢振霞, 毕黎琦
doaj  

高效表达型T克隆载体的构建及其特性

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2009
目的研制高效表达型T载体用于基因的表达及蛋白功能分析。方法限制性内切酶EcoR V酶切真核表达载体pcDNA3,回收线性化质粒片段与三磷酸胸腺嘧啶脱氧核苷酸(dTTP)70℃退火,构成T克隆载体并回收纯化。将增强绿色荧光蛋白基因(EGFP)和中国旱獭α干扰素基因(cwIFNA5)分别扩增后直接克隆到新构建的表达型T载体,转化感受态细菌,挑选阳性菌并制备质粒瞬时转染真核细胞,荧光显微镜观察EGFP的表达,病毒保护试验检测中国旱獭α干扰素的生物学活性。结果成功构建了表达型T载体 ...
卢银平, 祝建芳, 刘朝, 董继华
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抑制葡萄糖调节蛋白78基因表达逆转卵巢癌顺铂耐药作用的实验研究

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2010
目的探讨以葡萄糖调节蛋白78(GRP78)基因为靶向的RNA干扰(RNAi)抑制GRP78基因的表达,对人卵巢癌顺铂耐药细胞株SKOV3/DDP的影响。方法以GRP78基因为靶向的pSilencerTM3.0-H1-GRP78 siRNA重组质粒的构建,脂质法转染至细胞中;RT-PCR及Western blot方法检测GRP78 mRNA及蛋白表达;Western blot方法检测CHOP蛋白表达;MTT法检测不同浓度顺铂作用下细胞存活率,计算IC50及耐药指数。结果 RT-PCR及Western ...
范丽梅   +4 more
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转染 p53 抑癌基因体外抑制 K562 细胞克隆的形成

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1999
目的: 构建 p53 表达质粒, 研究 p53基因对白血病细胞 K562 细胞生长的抑制作用。方法: 以 T4 连接酶把 2 160 bp 的 p53 cDNA 片段插入 pRc/CMV 质粒, 重组构建 pRc/p53 表达质粒,以 Lipofectin 介导pRc/p53 质粒转染K562 细胞,以甲 基纤维素半固体培养方法作 K562 细胞体外克隆培养, 观察转染 p53 基因后 K562 细胞克隆形成改变。结果: p53 cDNA 质粒 转染的 K562 细胞, 体外培养克隆形成能力明显减低 ...
doaj  

SIK2抑制3T3-L1脂肪细胞脂肪合成的效应及机制

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2012
目的探讨盐诱导基因(Salt Inducible Kinase 2,SIK2)对3T3-L1成熟脂肪细胞生脂的影响及其机制。方法利用小鼠SIK2重组腺病毒表达载体,转染3T3-L1成熟脂肪细胞,采用油红O染色提取法和RT-PCR,测定脂肪细胞生脂及其关键酶和转录因子固醇调节元件结合蛋白1(SREBP1)mRNA水平的变化。结果与未转染组和空载体转染组相比,SIK2转染组油红O染色提取的脂滴含量降低56 ...
杜静   +5 more
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内毒素相关受体基因共转染肠上皮细胞最佳转染条件的探索

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2006
目的探讨内毒素(LPS)相关受体CD14、Toll样受体4(TLR4)和MD-2基因共转染人小肠上皮细胞株(HIC)的最佳转染条件。方法用核糖核酸酶保护法(RPA)检测基因转染效率,分别研究质粒DNA的量、FuGENE 6转染试剂与质粒DNA的比例、转染试剂-质粒DNA复合物与靶细胞的作用时间及培养液中血清存在与否对转染效果的影响。结果FuGENE 6转染试剂转染HIC的最佳转染条件是:每种质粒DNA的量为2.0μg(使用6 cm培养皿)、转染试剂与质粒DNA的比例为4∶1、转染试剂 ...
张道杰, 蒋建新, 陈永华
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[Clinical characteristics of DUX4-IGH fusion B-cell acute lymphoblastic leukemia in children]. [PDF]

open access: yesZhongguo Dang Dai Er Ke Za Zhi
Luo YX   +4 more
europepmc   +1 more source

Snail基因慢病毒载体的构建及其促进结肠癌细胞上皮间质化的研究

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2012
【目的】 构建Snail基因慢病毒载体,研究Snail基因的表达与结肠癌细胞上皮间质化的关系。【方法】 利用Gateway Technology法构建Snail基因表达质粒和空白对照质粒,行慢病毒包装,成功构建Snail基因慢病毒载体后,在结肠癌细胞系caco2中转染Snail基因质粒及空白载体对照,构建稳转细胞株caco2- Snail和caco2-vc,并在LoVo细胞中瞬时转染上述质粒,对Snail及E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达进行检测,并用划痕 ...
doaj  

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