Results 61 to 70 of about 12,568 (154)
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2002 【目的】探讨高效阳离子脂质体介导外源基因转染体外生长的小鼠脾细胞的方法。【方法】用新型阳离子脂质 体DOSPER 包裹携带lac Z 报告基因的质粒pCAGGS-lacZ 按3 种方法转染小鼠脾细胞, ①常规方法直接转染;②脾细胞经刀 豆球蛋白A(Con A)活化后再按常规方法转染;③用黏附辅助脂质体法(adhesion-assisted lipofection , AAL)转染脾细胞。转染 效率用X-gal 染色法测定。【结果】上述3 ...
何承伟
doaj
The influence of mifepristone on expression of P-gp in trophoblastic cells [PDF]
, 2008 目的观察米非司酮对滋养叶细胞P-糖蛋白(p-glycoprotein P-gp)表达的影响方法应用免疫组织化学方法,对30例药物流产的绒毛组织进行P-gp染色,取30例人工流产的绒毛组织作为对照。结果人工流产标本中的绒毛上皮的P-gp表达全部呈强阳性。而药物流产的绒毛90%表 ...
李娜, 温兰玲, 钱洪流
core
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2008 目的通过观察转染生肌调节因子（myoblast determination,MyoD）基因和连接蛋白43（Connexin）基因的大鼠真皮成纤维细胞（dermal fibroblast,DFs）生物学功能的变化,探讨Myo和Cx43基因转染DFs细胞的意义。方法采用Gateway技术,构建真核质粒表达载体,利用慢病毒（LV）表达系统,将大鼠MyoDcDNA和Cx43 cDNA转入大鼠成纤维细胞中,经Blasticidin筛选培养,通过RT-PCR,Western ...
张旭敏 +4 more
doaj
Expression of RGS16 protein induced by wide type p53 gene in rat glioma C6 cell line [PDF]
, 2008 目的:探讨内外源性野生型p53是否可以诱导大鼠胶质瘤细胞C6RGS16表达。方法:在大鼠胶质瘤细胞C6中,分别转染pEGFP-C3-wtp53或以400ng/ml表阿霉素诱导内源性野生型p53表达,于处理后0h、4h、8h、16h、26h、32h和52h收集细胞爬片、固定后免疫细胞化学检测p53蛋白与RGS16蛋白表达。结果:转染pEGFP-C3-wtp53后4h、8h、16h、26h和32h时均检测到p53蛋白表达,在8h和16h时检测到RGS16蛋白表达;在400ng/ml表阿霉素处理后 ...
张丰(第四军医大学病理学教研室) +5 more
core
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2009 目的构建针对细胞内氯通道4（CLIC4）的短链干涉RNA（siRNA）及其表达载体,转染细胞后观察其对CLIC4基因的干涉作用。方法设计CLIC4靶向的发夹状siRNA,据此设计合成两条互补的寡核苷酸链,退火后连接到pSilencer3.1-H1载体,转化扩增后进行序列测定。用脂质体转染法转染大鼠神经胶质瘤细胞C6,通过RT-PCR检测CLIC4基因表达水平的变化。结果酶切鉴定与DNA测序分析证明CLIC4基因的siRNA载体构建正确,RT-PCR结果表明CLIC4基因的表达水平明显降低 ...
袁兆新 +8 more
doaj
, 2009 目的构建人死亡受体5(death receptor5,DR5)全长基因真核细胞表达载体pcDNA3.1/DR5,pcDNA3.1/GFP/DR5,并观察其转染胶质瘤细胞U138的效果。方法通过重叠PCR获得DR5全长编码序列,构建pcDNA3.1/GFP/DR5,pcDNA3.1/DR5表达载体,利用脂质体转染试剂盒,分别将2种质粒pcDNA3.1/GFP/DR5、pcDNA3.1/GFP共转染胶质瘤细胞U138,转染后72h,半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测DR5mRNA的表达 ...
孟庆宇 +7 more
core
野生动物学报, 2015 根据Gen Bank中发表的犬瘟热病毒(CDV)的基因组序列设计了H和F基因的2对引物,通过RT-PCR扩增出从发病小熊猫分离的CDV的H和F基因,并将其克隆入到18T-simple载体上进行测序。使用Kpn I和Xho I限制性内切酶对重组载体进行双酶切并将目的基因克隆到pcDNA 3.1表达载体上,构建完成后转染293T细胞,转染48 h后,再利用RT-PCR和Western-blot检测目的基因的转录和目的蛋白的表达。结果表明,表达载体经转染后,在293T细胞中,目的基因均能得到转录而且正确表达 ...
张晓明 陈 武 彭仕明
doaj
Effect of shear stress on inhibitor of apoptosis protein-2 expression in human umbilical vein endothelial cells [PDF]
, 2007 的:本研究目的是阐明血流剪切应力抑制血管内皮细胞凋亡的分子机制。方法:人脐静脉内皮细胞(HUVECs)培养于DMEM,当细胞融合时,转染Smac基因,将细胞暴露于20dyne/cm2的剪切应力,分别测定人类凋亡蛋白抑制剂(human inhibitor of apoptosis protein-2,HIAP-2)蛋白表达及细胞凋亡蛋白酶(caspase-3)活性。结果:20dyne/cm2的剪切应力抑制caspase-3活性的增加,此作用与剪切应力能够明显诱导内皮细胞产生HIAP-2蛋白表达明显增加有关。
臧彬, 舒强, 金鑫
core
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2008 【目的】将G250抗原cDNA片段转染入sp2/0细胞中并获得稳定表达,为G250基因疫苗研究提供实验工具。【方法】用脂质体转染法将鉴定好的重组质粒转染入sp2/0细胞中,经G418筛选得到稳定表达,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、间接免疫荧光、Western blot检测G250基因在sp2/0细胞中的表达。【结果】转染2周后,筛选出阳性sp2/0细胞克隆,通过RT-PCR证实有G250mRNA转录,间接免疫荧光可以见到阳性细胞,Western blot证实有G250抗原表达。【结论 ...
张亚东 +5 more
doaj
阳离子聚合物介导下白细胞介素1受体拮抗剂基因兔角膜原位转染及其表达 [PDF]
, 2006 目的探讨阳离子聚合物即线性聚乙烯亚胺(PEI)介导下兔角膜基质注射PEGFP-IL- 1ra质粒进行基因角膜原位转染的有效性和安全性。方法以人cDNA文库为模板进行聚合酶链反应(PCR),获得人IL-1ra cDNA片段,构建重组质粒PEGFP-hIL-1ra。以阳离子聚合物为介导转染角膜内皮细胞,通过绿色荧光蛋白(GFP)示踪、蛋白免疫印迹技术检测转染后IL-1ra基因和蛋白的表达。实验组30只Wistar大鼠角膜基质注射PEGFP-hIL-1ra质粒和PEI-in-vivo的混合溶液20μl ...
刘祖国 +5 more
core