Results 1 to 10 of about 3,860 (145)
以β-淀粉样蛋白为靶的单价及二价真核表达载体的构建和表达 [PDF]
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2006 【目的】构建以β-淀粉样蛋白为靶单价及二价真核表达载体pcDNA3．1-Aβ1-42、pcDNA3．1-AB42x，并在真核细胞中表达目的蛋白。【方法】PCR法扩增编码B一淀粉样蛋白的目的基因，利用基因克隆技术构建单价及二价真核表达载体；应用酶切及测序鉴定真核表达载体构建成功后，用Western blot和细胞免疫组化染色检测其在真核细胞中的表达。【结果】相应的双酶酶切能够获得插入的目的基因片段（分别为137bp和269bp），测序未发现突变；Western blot结果可见两条约为4ku和8ku的条带，
王烈峰 +6 more
doaj +2 more sources
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2007 【目的】构建以基因佐剂hGM-CSF基因为基础的真核表达质粒pIGM-CSF,并在宫颈癌细胞HeLa中表达与鉴定。【方法】采用聚合酶链反应从载体pORF-hGM-CSF中,扩增出hGM-CSF基因,克隆到双顺反子真核表达载体pIRES的多克隆位点B（MCSB）中,构建pIGM-CSF真核表达载体。然后采用脂质体转染法将其转染HeLa细胞,用RT-PCR在RNA水平和ELISA在蛋白水平检测其在真核细胞中的表达。【结果】所克隆hGM-CSF基因片段经测序完全正确;重组质粒转染Hela细胞后,检测有hGM ...
卢燕茹, 江振友
doaj +2 more sources
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2007 【目的】构建载有小鼠抵抗素（resistin）基因及其反义核酸的重组真核表达质粒，探讨抵抗素对3T3-L1脂肪细胞葡萄糖摄取的影响。【方法】用RT-PCR技术从小鼠脂肪组织扩增抵抗素基因cDNA，A／T克隆于pGEM-T载体，再亚克隆于pcDNA3．1（＋）和pcDNA3．1（-）真核表达载体，构建载有小鼠抵抗素（resistin）基因及其反义核酸的重组真核表达质粒pcDNA3．1^（＋）resistin和pcDNA3．1^（-）-resistin^（-）。将pcDNA3．1^（-）resistin^（-
李芳萍 +4 more
doaj +2 more sources
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2006 本系列研究筛选了弓形虫（Toxoplasma）速殖子表膜主要抗原（SAG1或P30）及分泌排泄抗原棒状体蛋白基因（ROPl），并将二者拼接构建复合基因（sAG1／ROP1），对其进行扩增、克隆、表达，制备真核表达质粒，接种小鼠，研究其免疫保护效应，为弓形虫核酸疫苗的研制提供有积极意义的科学根据。
陈观今 +4 more
doaj +2 more sources
Effect and mechanism of microRNAs on various diabetic wound local cells microRNA对各种糖尿病创面局部细胞的作用及机制
Journal of Diabetes, Volume 15, Issue 11, Page 955-967, November 2023., 2023 Highlights For the first time, we have examined the impact of microRNA on diabetic wounds at a cellular level. We have analyzed how a particular microRNA influences different types of cells, uncovering its function and mechanism. This study furthers the discovery of the clinical potential of diverse microRNAs by evaluating their distinct effects and ...
Hongjie Li, Shengyu Jing, Hongbo Xu
wiley +1 more source
Developmental Medicine &Child Neurology, Volume 61, Issue 3, Page E1-E35, March 2019., 2019 目的 本国际临床指南由欧洲残疾儿童学会（the European Academy of Childhood Disability，EACD）牵头制定，旨在解决发育性协调障碍（developmental coordination disorder，DCD）的定义、诊断、评估、干预以及与社会心理方面的临床应用关键问题。 方法 本指南针对五个领域的关键问题，通过文献综述和专家团队的正式讨论达成共识。为保证指南的循证基础，以“机制”、“评估”和“干预”为检索词, 对2012年更新以来提出的最新建议以及新增的“社会心理问题”和“青少年/成人”为检索词进行检索。根据牛津大学循证医学中心证据等级 (证据水平 [level of evidence, LOE]1–4) 将结果进行分类，最终转化为指南建议。并由国际 ...
Jing Hua +6 more
wiley +1 more source
拟穴青蟹抗菌肽SCY2在毕赤酵母中的表达及其抗菌活性 [PDF]
, 2018 为深入研究拟穴青蟹Scylla paramamosain阴离子抗菌肽SCY2的抗菌活性,将抗菌肽SCY2的成熟肽序列与毕赤酵母Pichia pastoris的p PIC9K质粒连接,构建了分泌型表达载体p PIC9K-SCY2,用电击法将其转化至毕赤酵母GS115菌株中,经甲醇诱导表达和亲和纯化后获得目的蛋白,并进行质谱鉴定和抗菌活性分析。结果表明:本研究中成功构建了重组毕赤酵母菌株GS115/p PIC9K-SCY2,用0.5%甲醇诱导表达24 h后,分泌表达上清液中获得了相对分子质量约11 ...
刘杰, 彭会, 陈慧芸
core +1 more source
The optimized expression technology of marine animal-sourced antimicrobial peptides in Pichia pastoris and the development of antimicrobial peptide as feedstuff additive [PDF]
, 2015 抗生素污染问题是目前影响我国水产养殖业可持续健康发展的重大科技问题，抗生素（antibiotics）作为常用抗菌药物，被广泛应用于水产养殖业，但是抗生素超标所引起的细菌耐药性问题已成为全球公共健康问题，因此寻找抗生素的有效替代品是目前国内外本领域的研究热点之一。抗菌肽（antimicrobialpeptide）是先天性免疫的重要组分，广泛存在于生物界的各个门类，进化上相对保守，具有广谱抗菌活性、且不会产生细菌耐药性，被预言为最有希望替代抗生素的天然药物，具有广阔的应用前景 ...
彭会
core
Antimicrobial activities of Scygonadin2 and Sphistin from Scylla paramamosain and the synergistic effects with antibiotics against bacteria [PDF]
, 2015 抗生素（antibiotics）作为最广泛应用的抗细菌药物，目前被广泛应用于水产养殖业中，但超量、滥用抗生素造成了水产品药物残留超标等一系列问题，如何控制抗生素的过量应用是亟待解决的重要科学与生产问题，因此寻找抗生素的有效替代品是目前国内外本领域的研究热点之一。抗菌肽（antimicrobialpeptide）是先天性免疫中的重要免疫活性因子，具有广谱的抗菌性，且不会产生耐药性，在所有替代抗生素的选择中，抗菌肽被认为是普遍存在于各种生物中由基因编码的“天然抗生素”，是抗生素的最佳替代品之一 ...
刘杰
core
Construction of expression vector of HCV NS4B and its effect on cell apoptosis [PDF]
, 2017 目的 构建丙型肝炎病毒（HCV）2a型非结构蛋白4B（NS4B）的真核表达载体,并观察其对骨肉瘤细胞U2OS凋亡的影响。方法 以质粒PJFH1为模板,通过PCR反应扩增4目的基因片段,采用同源重组法与PCMV-tag2b载体相连,转化大肠杆菌感受态DH5α,筛选正确的克隆。以脂质体为介导转染U2OS细胞,通过Western blot检测NS4B蛋白的表达,免疫荧光检测细胞的凋亡。结果 构建pCMV-tag2b-NS4B重组质粒,经测序其与NCBI公布的序列完全一致,并可在U2OS细胞中表达 ...
任来峰 +7 more
core +1 more source