Results 21 to 30 of about 862,339 (152)
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2010 目的构建HSV-TK单基因和TK/hIL12融合基因的真核表达载体。方法 PCR扩增质粒pGT60-hIL12中HSV-TK与hIL12治疗基因片段,同时引入pcDNA3.1（+）多克隆酶切位点,构建HSV-TK单基因及其与hIL12融合基因的真核表达载体。结果 DNA测序分析、限制性双酶切鉴定证实构建的真核表达载体中治疗基因的序列、大小和方向正确。结论成功构建了pcDNA3.1-TK和pcDNA3.1-TK/hIL12真核表达载体,为进一步探索HSV-TK与hIL12基因的协同抗瘤作用提供实验基础。
杜晓媛 +5 more
doaj
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2006 目的构建人regucalcin（RGN）全长cDNA的真核表达载体,观察其在人肾皮质近曲小管上皮细胞（HK-2细胞）中表达。方法用RT-PCR技术扩增获得人HK-2细胞RGN全长cNDA,将扩增的产物连接入pMD18-T克隆载体上,将重组质粒转化入大肠杆菌DH5α内并提取质粒,双酶切鉴定、DNA测序鉴定准确,再用双酶切方法将RGN基因定向连接到真核表达载体pEGFP-N1中,构成pEGFP-RGN,将pEGFP-RGN转化入大肠杆菌DH5α内并提取质粒,双酶切鉴定、DNA测序鉴定准确 ...
徐洪 +4 more
doaj
, 2005 用RACE PCR获得了鳜白介素-1β(IL-1β)的全长cDNA.鳜IL-1β的cDNA全长为1298 nt(核苷酸),其5′非编码区包含UTR 93 nt;3′非编码区包含452 nt;其开放阅读框内包含753 nt,翻译成251个氨基酸.将鳜IL-1β克隆到原核表达载体pET-32a上,在大肠杆菌Rosetta- gami(DE3 ...
王改玲,孙宝剑,王高学,聂品
core
丙肝核心抗原-CD40L胞外段真核表达载体的构建及其免疫原性分析
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2013 目的构建丙肝核心抗原-CD40L胞外段融合蛋白真核表达载体,并探讨其免疫原性。方法应用基因重组技术在原有载体的基础上构建真核表达载体pcDNA3.1-core-CD40L并加以鉴定。该表达质粒肌肉内注射免疫小鼠,ELISA法检测小鼠外周血中抗丙肝核心抗体,流式细胞仪检测小鼠外周血T淋巴细胞亚型,real time PCR法检测外周血单个核细胞内细胞因子,CTL杀伤实验检测小鼠脾淋巴细胞的杀伤活性。结果构建了真核表达载体pcD-NA3.1-core-CD40L ...
陈佳玉 +4 more
doaj
, 2001 【目的】构建人Ⅰ 型基质金属蛋白酶基因(MMP1)真核表达重组质粒, 并进行序列分析。【方法】用逆转录聚 合酶链反应扩增人Ⅰ 型基质金属胶原酶cDNA, 获得目的基因片段(1 407 bp)连接至pcDNA3 载体, 并转化大肠杆菌DH5α, 筛 选阳性克隆并鉴定, 并对片断全长进行DNA 序列测定。【结果】所克隆人Ⅰ 型基质金属胶原酶cDNA, 含全长MMP1 编码区, 与GeneBank 公布序列比较, 仅1 318 位的胞苷酸C 突变为腺苷酸A。并成功构建了含有MMP1 ...
彭 慧, 汪 谦, 黄洁夫
core
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2009 目的构建pEGFP-N1/BMP-2真核表达质粒,并进行鉴定。方法利用RT-PCR方法从组织中提取骨形态发生蛋白（BMP-2）的基因片段,与pMD18-T载体连接,构建pMD18-T/BMP-2重组质粒,酶切后与pEGFP-N1真核表达载体连接,构建pEGFP-N1/BMP-2真核表达质粒,进行测序、酶切鉴定,表明质粒构建成功。结果通过测序、酶切鉴定,证明pMD18-T/BMP-2质粒构建成功。结论本实验成功构建了pEGFP-N1/BMP-2真核表达质粒,为进一步研究利用BMP ...
张明磊 +4 more
doaj
四膜虫基因表达数据库:四膜虫全基因组基因表达芯片和协同表达分析的数据资源
, 2010 嗜热四膜虫是一种优良的真核模式生物,对其功能基因组学的分析将为研究细胞和分子生物学的基础性重大问题提供新的机遇.四膜虫基因表达数据库(TGED)是原生动物纤毛虫中第一个基因表达数据库,整个数据库包括了四膜虫3个重要的生理和发育阶段20个时间点的全基因组基因表达数据,提供了友好的网页界面(http://tged.ihb.ac.cn)供用户获取这些数据.通过基因的标识号或描述信息,用户可以获取基因表达谱信息和协同表达基因.此外,TGED同时提供了制备四膜虫基因表达芯片的样品制备方法 ...
陆钰明 +10 more
core
Bcl-xL和BDDFⅧ在CHO-DG44细胞中共表达及抗凋亡能力分析
四川大学学报. 自然科学版, 2015 在CMV启动子控制下构建含有B区缺失型FⅧ基因(BDDFⅧ)和Bcl-xL基因编码序列的真核表达载体pF8B和只含B区缺失的FⅧ基因(BDDFⅧ)的真核表达载体pF8,通过双酶切和测序验证重组真核表达载体构建的正确性;经过MTX压力筛选得到稳定表达BDDFⅧ活性的CHO-F8B和CHO-F8细胞株.在相同可控培养参数下进行发酵培养,Bcl-xL基因过表达赋予CHO-F8B细胞较强的抗调亡能力和更高的BDDFⅧ表达活性,BDDFⅧ的表达活性后者是前者的5倍多.
王继超 +5 more
doaj
含副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus) Fla I基因真核表达重组质粒的构建 [PDF]
, 2002 用ClaⅠ /EcoRⅠ双酶切带有副溶血弧菌 (Vibrioparahaemolyticus)极鞭毛蛋白FlaI基因的质粒pMD18 FlaI,回收目的基因片段 ,插入到真核细胞表达载体pIRESneo同样经ClaⅠ /EcoRⅠ切开的窗口中 ,成功地将FlaI克隆到pIRESneo中 ,获得有意义的重组质粒pIRESneo FlaI.构建的pIRESneo FlaI真核表达重组质粒 ...
张朝霞 +5 more
core
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2009 目的构建人紧密连接蛋白claudin-6的cDNA真核表达载体。方法应用RT-PCR、T-A克隆、限制性内切酶切及亚克隆等技术将claudin-6基因全长克隆入真核表达载体pcDNA3.1（+）质粒中。结果酶切鉴定、PCR扩增以及序列分析表明已经将claudin-6基因全长序列克隆入真核表达载体pcDNA3.1（+）质粒中。结论获得了人claudin-6基因的全长cDNA片段,构建了claudin-6原核克隆载体和真核表达载体。实验中发现,中国人claudin-6基因的461位点碱基为A ...
吴琼 +7 more
doaj