Results 41 to 50 of about 862,339 (152)
, 2004 【目的】构建人resistin基因原核表达载体并观察其表达,为开展对resistin的研究打下实验基础。【方法】酚氯仿一步法从一位2型糖尿病合并胆管癌患者腹壁皮下脂肪组织抽取总RNA,RT-PCR法扩增出re-sistin基因cDNA,经测序后,PCR产物亚克隆入T载体,用EcoRI和KpnI分别酶切重组T质粒和原核表达载体pGENKS,然后resistin基因片段和表达载体通过T4DNA连接酶进行定向连接,用核酸内切酶EcoRI、KpnI酶切和测序方法鉴定出重组表达质粒 ...
core
食管癌中真核翻译起始因子5A2的表达及与预后的相关性 [PDF]
, 2017 【目的】探讨真核翻译起始因子5A2（EIF5A2）在食管鳞状细胞癌（ESCC）中的表达及其临床意义。【方法】运用 免疫组化方法，检测 EIF5A2 蛋白在 135 例食管鳞状细胞癌中的表达水平，分析其与临床病理参数之间的相关性及其预 后价值。【结果】在135例ESCC患者中高表达68例，Pearson′s 卡方检验结果显示EIF5A2在ESCC中的表达水平与T分期 （P = 0.006）、淋巴结转移（P = 0.031）、临床分期（P = 0.026）显著相关 ...
张新科 +5 more
core
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2000 【目的】构建含乙型肝炎病毒(HBV)编码核心蛋白(HBcAg)的核心(C)基因的真核表达重组体, 以进行核酸免疫及 相关研究。【方法】以含HBV(ayw 亚型)全基因序列的质粒pHBV1 为模板, 用PCR 的方法获得编码HBcAg 的C 基因片段 (nt1889 ～ 2457), 该基因片段两端设计了BamH Ⅰ 和EcoRⅠ 的限制性内切酶位点, 以便通过定向克隆将其插入真核表达质粒 载体pcDNA3 相应的多克隆位点。【结果】经BamH Ⅰ 和EcoRⅠ 酶切后琼脂糖凝胶电泳鉴定 ...
韦 嘉 +4 more
doaj
, 2005 从籼稻川75A(OryzasativaL.)黄化苗叶片中直接提取基因组总DNA.根据文献报道的水稻花药绒毡层特异启动子Osg6B序列设计引物,采用TouchdownPCR技术获得水稻花药绒毡层特异表达的启动子Tsp1,将该片段克隆在载体pMD18-TVector上转化到大肠杆菌JM109,并酶切和PCR验证.序列分析发现,该片段与Osg6B启动子同源性为96%,且具有真核生物启动子的多种特征序列,表明启动子Tsp1为来源于籼稻川75A中的水稻花药绒毡层特异表达的启动子 ...
陈荣军 +4 more
core
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2010 目的构建核转录因子κB抑制蛋白激酶（inhibitor of kappa B kinase,IKK）β真核表达载体,以便进一步探讨其生物学作用。方法从人正常肝细胞L02中提取RNA,并利用IKKβ特异性引物通过RT-PCR方法扩增了IKKβcD-NA,并克隆入pcDNA3载体中,构建重组载体pcDNA3-IKKβ。将重组载体转染入HEK293细胞中,并通过免疫印迹方法检测IKKβ的表达。结果酶切及测序结果显示,重组质粒构建成功;免疫印迹结果显示 ...
张冬梅 +6 more
doaj
, 2014 目的构建PHD2基因原核表达载体pET43.1b(+)-PHD2,实现Nus-PHD2融合蛋白在大肠埃希菌中的可溶性表达。方法用Sac I酶切pET43.1b(+)制备线性化载体,设计与线性化载体两端具有至少15个同源序列的特异性引物,以真核重组质粒pCMV6-Entry-EGLNl为模板,PCR法扩增PHD2目的基因。采用In-Fusion技术构建原核表达载体pET-43.1b(+)-PHD2,并将其导入大肠埃希菌BL21 (DE3)中诱导表达。用SDS-PAGE和Western ...
许国旺 +4 more
core
hCAP-18/LL-37全长肽真核表达产物对树突状细胞分化成熟的影响
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2010 目的研究人源阳离子抗菌肽（hCAP）-18/LL-37全长肽真核表达产物对树突状细胞分化成熟的影响。方法将已构建的hCAP-18/LL-37全长肽真核表达载体pcDNA4/Myc-His-hCAP-18转染Hela细胞株,在转染后48 h收获培养上清;人外周血单个核细胞分离,体外定向诱导分化成树突状细胞（DC）;将转染后收获的培养上清与体外培养的DC共同孵育,48 h收获DC,经流式细胞仪检测DC表面分子CD83、CD86、CD40及HLA-DR的表达。结果FCM结果显示:pcDNA4/Myc-His ...
袁红艳, 许娜, 王凤丽, 常雅萍
doaj
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2009 目的在人骨髓间充质干细胞内大量稳定的表达人白血病抑制因子（human Leukemia Inhibitory Factor,hLIF）。方法应用RT-PCR方法从人蜕膜组织中扩增出白血病抑制因子,并将其构建于pcDNA3.1真核表达载体上。利用脂质体进行基因骨髓间充质干细胞的转染。利用G418进行基因的稳定表达筛选。通过RT-PCR和Western blot方法进行基因表达的检测。结果成功扩增出人白血病抑制因子基因,成功构建hLIF-pcDNA3.1真核表达载体。转染LIF-pcDNA3 ...
杨春辉, 杜珍武, 杨光, 尹维田
doaj
恶性疟原虫红内期p41-3 基因真核表达重组质粒的构建及序列分析 [PDF]
, 2001 【目的】构建恶性疟原虫海南(FCC1/ HN)株p41-3 基因真核表达重组质粒pcDNA3-p41-3 ;测定p41-3 基因序列, 并了解FCC1/HN 株与其它分离株p41-3 序列的差异。【方法】根据p41-3 基因已知序列设计合成2 对引物, 用PCR 技术从 FCC1/ HN 株基因组DNA 中扩增p41-3 基因;将p41-3 基因定向克隆入真核表达载体pcDNA3 , 转化大肠杆菌DH5α感受态细 胞;用酶切, PCR 扩增鉴定筛选到的重组质粒阳性克隆。以正确的重组质粒为模板 ...
李学荣 +5 more
core
, 2012 【目的】 探讨真核延伸因子1A2(eEF1A2)在肝细胞癌(HCC)中的表达及其临床病理意义。 【方法】 收集104例HCC患者的临床病理资料,利用组织芯片对其癌及癌旁肝组织进行免疫组化检测,应用统计学方法分析eEF1A2在这些组织中的表达水平及与患者临床病理特征的关系。【结果】 免疫组化结果显示:56.7%肝癌组织中eEF1A2高表达(eEF1A2 ++,eEF1A2+++),而仅13.5%的癌旁肝组织呈高表达,差异具有统计学意义(P = 0.014)?eEF1A2的表达与乙肝病毒感染(P = 0 ...
core