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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2000 【目的】构建含乙型肝炎病毒(HBV)编码核心蛋白(HBcAg)的核心(C)基因的真核表达重组体, 以进行核酸免疫及 相关研究。【方法】以含HBV(ayw 亚型)全基因序列的质粒pHBV1 为模板, 用PCR 的方法获得编码HBcAg 的C 基因片段 (nt1889 ～ 2457), 该基因片段两端设计了BamH Ⅰ 和EcoRⅠ 的限制性内切酶位点, 以便通过定向克隆将其插入真核表达质粒 载体pcDNA3 相应的多克隆位点。【结果】经BamH Ⅰ 和EcoRⅠ 酶切后琼脂糖凝胶电泳鉴定 ...
韦 嘉 +4 more
doaj
Effect of Beta-arrestin1 and TFF3 on Biological Characteristics of Human Gastric Cancer BGC-823 Cells [PDF]
, 2011 Beta-arrestin包括Beta-arrestin1和Beta-arrestin2两种蛋白，它们在体内广泛表达，可以调节G蛋白耦联受体（Gproteincoupledreceptor，GPCR）的脱敏和内吞，是多种信号通路中的多功能调节因子。TFF3是三叶因子家族（Trefoilfactors-TFFs）成员之一，TFFs是主要由胃肠道黏液细胞分泌的可溶性小分子多肽，它们在慢性炎症、黏膜保护修复、细胞凋亡、组织化生及肿瘤的发生发展等方面具有重要的生物学功能。本实验首次在胃癌细胞BGC ...
王璐
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2004 ［目的 l 构建人肝豆状核变性病ATP7B基因野生型及常见突变型的小鼠肝脏特异性表达载体 ALB-ATP7B, 为制备转基因小鼠及相关基因治疗作准备。【方法】定点突变法获取人群中常见的Arg778Leu及 Hisl069Gln两种ATP7B基因突变体，定向克隆将小鼠白蛋白启动子ALB序列及野生和突变的ATP7B基因亚克 隆至真核表达载体kbpala上， 得到可在小鼠肝脏特异性表达的人ATP7B基因正常及突变型真核表达载体 ALB-ATP7B。【结果】经测序及酶切鉴定证实， 真核表达载体ALB ...
doaj
hCAP-18/LL-37全长肽真核表达产物对树突状细胞分化成熟的影响
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2010 目的研究人源阳离子抗菌肽（hCAP）-18/LL-37全长肽真核表达产物对树突状细胞分化成熟的影响。方法将已构建的hCAP-18/LL-37全长肽真核表达载体pcDNA4/Myc-His-hCAP-18转染Hela细胞株,在转染后48 h收获培养上清;人外周血单个核细胞分离,体外定向诱导分化成树突状细胞（DC）;将转染后收获的培养上清与体外培养的DC共同孵育,48 h收获DC,经流式细胞仪检测DC表面分子CD83、CD86、CD40及HLA-DR的表达。结果FCM结果显示:pcDNA4/Myc-His ...
袁红艳, 许娜, 王凤丽, 常雅萍
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基于立即早期蛋白IE62建立水痘-带状疱疹病毒感染性滴度检测方法 [PDF]
, 2018 目的:基于水痘-带状疱疹病毒(VZV)立即早期蛋白IE62与酶联免疫斑点检测技术(ELISpot)建立一种新型的VZV感染性滴度的快速检测方法。方法:应用生物信息学方法设计并合成VZV-IE62蛋白的多肽抗原,牛血清白蛋白偶联后免疫BALB/c小鼠,筛选和制备抗VZV-IE62单克隆抗体,应用Western blot和免疫荧光法等开展抗体性能评价,继而应用酶联免疫斑点技术(ELISpot)结合生物素-亲和素放大法建立新型的VZV感染性滴度检测方法,并与经典空斑计数法进行比较。结果:获得抗VZV ...
付文锟 +7 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2009 目的在人骨髓间充质干细胞内大量稳定的表达人白血病抑制因子（human Leukemia Inhibitory Factor,hLIF）。方法应用RT-PCR方法从人蜕膜组织中扩增出白血病抑制因子,并将其构建于pcDNA3.1真核表达载体上。利用脂质体进行基因骨髓间充质干细胞的转染。利用G418进行基因的稳定表达筛选。通过RT-PCR和Western blot方法进行基因表达的检测。结果成功扩增出人白血病抑制因子基因,成功构建hLIF-pcDNA3.1真核表达载体。转染LIF-pcDNA3 ...
杨春辉, 杜珍武, 杨光, 尹维田
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, 2016 随着科学技术的发展，重金属离子污染越来越严重，严重危及人类健康和安全。如何降低重金属对人体危害已成为目前亟待解决安全性问题之一。金属硫蛋白（MT）作为高效的天然解毒剂，一直是生物学与医学领域中基础研究和应用研究的热点之一，并在医学、化妆品、保健食品添加剂、环保等方面得到了广泛的应用。目前，国内市场上常见的MT多数是从兔肝脏中提纯，由于MT原料需求特别，MT原料来源已成为制约该领域发展的瓶颈之一。利用原核大肠杆菌作为表达宿主，采用基因重组和发酵技术是获得大量高纯MT的重要途径之一 ...
阎光宇
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Molecular characterization and immune activity of an anti-lipopolysacchride factor from red claw crayfish Cherax quadricarinatus [PDF]
, 2017 对虾白斑综合症病毒（Whitespotsyndromevirus，WSSV）的宿主范围广泛，能感染绝大多数的虾蟹类，是虾蟹类水产养殖业的主要病原，传染力强，致死率高，给全球水产养殖业造成了巨大的经济损失。由于对WSSV的致病机理知之甚少，至今为止仍未找到一个行之有效的方法根治WSSV。在课题组的前期研究中，从WSSV感染的红螯螯虾（Cheraxquadricarinatus）造血组织（Haematopoietictissue，Hpt）细胞差异基因表达谱中筛选到了两种抗脂多糖因子（Anti ...
林凤瑜
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2011 目的构建mB7-1真核表达载体并检测其在B16细胞中的瞬时表达情况。方法提取小鼠脾细胞mRNA,PCR法获得mB7-1片段,与pcDNA3连接,并进行酶切鉴定及测序。重组质粒经脂质体介导转染鼠B16细胞,检测基因表达情况。结果完成mB7-1-pcDNA3重组载体连接及鉴定,基因测序与Genebank一致,并转染至B16细胞,检测到基因表达。结论成功构建mB7-1-pcDNA3真核表达载体,获得mB7-1表达细胞系,为研究其抗瘤效应奠定了基础。
金洪娟, 王权, 所剑
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Oral immunization studies relied on the live attenuated bacteria in vivo expressing antimicrobial peptides AS-prohepc2 and Scy1 in fish [PDF]
, 2015 抗菌肽是鱼、虾、贝等非特异性免疫防御系统的主要成分之一，在防御外源性病原体入侵方面起着重要作用。作为一类独特的天然免疫活性物质，抗菌肽具有广谱的抗微生物活性和免疫调节活性。迄今从鱼类、甲壳动物、贝类等海洋动物中已分离获得了多种不同类型的抗菌肽，并揭示了其基因和蛋白结构以及表达特性、抗微生物活性以及某些抗菌机理；现有试验结果亦逐渐证明抗菌肽有望作为抗生素一定程度的替代品，在水产养殖业及其他行业具有应用前景，但迄今对其有效利用途径且进入机体后的免疫效应知之甚少。 天然运载载体（如细菌、病毒和哺乳动物细胞等 ...
陈贝
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