Construction of the eukaryotic expression vector pIRES2-EGFP-Axin and its expression in glioma cells [PDF]
, 2005 目的:构建真核表达载体pIRES2EGFPAxin,并在神经胶质瘤细胞系C6中进行表达。方法:用PCR的方法扩增Axin基因,构建真核表达载体pIRES2EGFPAxin,经NheI及SalI双酶切鉴定并测序。通过脂质体法转染C6细胞,用荧光显微镜检测细胞中增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的表达,用免疫组化染色的方法检测细胞中Axin的表达。结果:构建了真核表达载体pIRES2EGFPAxin,用脂质体法转染神经胶质瘤细胞C6后,经荧光显微镜和免疫组化染色法检测,可见细胞内有EGFP及Axin的表达。结论:
叶菁(第四军医大学西京医院病理科) +6 more
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miRNA-17~92 Inhibits Colorectal Cancer Progression by Targeting Angiogenesis [PDF]
, 2015 miRNA中的miR-17~92簇在包括结直肠癌（Colorectalcancer，CRC）等人类癌症中广泛表达。已有的研究表明miR-17~92在某些肿瘤模型中可促进肿瘤发生和癌组织血管生成。然而，其在CRC发生和进展中的作用仍然未知。在本研究中，我们意外发现，在用氧化偶氮甲烷（AOM）和右旋糖酐硫酸钠（DSS）诱导的CRC动物模型中，大肠、小肠上皮细胞过表达miR-17~92的转基因小鼠可见肿瘤体积变小、肿瘤血管减少。进一步研究发现，miR-17 ...
潘金水
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Study on the Molecular Mechanisms of dlk1 Stimulated Lung Cancer Cell Proliferation [PDF]
, 2010 Background and objective The imprinted gene dlk1 has been recognized as a cancer related gene since it aberrantly expressed in a series of cancer tissues, but its role in lung cancer is still unknown. The aim of this study is to examine dlk1’s expression
Bing LING +10 more
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Research on expression of HIV-1 env in baculovirus [PDF]
, 2000 昆虫细胞杆状病毒表达系统(BEVS)是真核表达系统的一种，以一种无需额外辅助的重组昆虫杆状病毒作为表达载体，目前已被应用来表达不同来源的基因，如细菌、病毒、植物和哺乳动物的基因。它具有表达产量高，蛋白经过完善的后处理过程，如内含子剪切、糖基化等特点。其原理是通过外源基因置换病毒的核多角体蛋白基因，使外源基因在核多角体蛋白启动子下高效表达。本论文中采用BEVS表达HIV-1包膜蛋白，目的在于弥补原核表达系统不能表达大片段的、高度糖基化的重组蛋白；并探索其应用在检测试剂中的前景。Baculovirus ...
郭庆
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2012 目的构建人类GPC3重组真核表达载体。方法以人类肝脏cDNA文库为模板扩增出GPC3基因序列,应用T克隆载体及pcDNA真核表达载体重构,将质粒转化进入HLE人肝癌细胞系,进行荧光免疫方法检测。结果 测序结果序列正确,荧光染色转染质粒的HLE细胞可见细胞浆和细胞膜上有GPC3的表达。结论成功构建真核表达载体pcDNA-GPC3,并在真核细胞中可以表达。
李莉 +4 more
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Affinity Maturation of Human Immunodeficiency Virus Diagnostic Antibody [PDF]
, 2012 9E8是本实验室筛选获得的一株针对人类免疫缺陷病毒（HumanImmunodeficiencyVirus，HIV）的鼠源抗体，其亲和力为3.23×10-10M，目前已经成功应用到本实验室开发的HIV诊断试剂盒中，但其灵敏度和特异性都还有待提高。 本研究的目的就是利用噬菌体展示技术对HIV诊断抗体9E8进行亲和力成熟，进一步提高HIV诊断的灵敏度和特异性。首先，用RT-PCR的方法从杂交瘤细胞中调取鼠源抗体9E8的可变区基因，将其构建成单链抗体VH-(G4S)3-VL的形式，展示到噬菌体pIII蛋白上 ...
李善伟
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Molecular cloning, expression and immunohistochemical localization of Ac-ALMP, an astacin-like metalloprotease from Angiostrongylus cantonensis [PDF]
, 2016 广州管圆线虫病是一种人畜共患的寄生虫病。它是因人进食含有广州管圆线虫感染期幼虫的食物或水源而引起的。随着人们饮食习惯的改变和水陆交通的日趋发达，该病的流行呈逐年上升的趋势，目前尚无理想的特效药对该病进行防治。虾红素金属蛋白酶是金属蛋白酶家族的一员，研究发现，其在寄生虫寄生生活中发挥一系列不同的生物学功能。但是目前国际上，关于广州管圆线虫虾红素金属蛋白酶的报道几乎没有。 本研究为探索广州管圆线虫虾红素金属蛋白酶在虫体中的功能，对其基因进行调取，我们通过虾红素金属蛋白酶EST序列设计引物进行RACE克隆 ...
MEKS EDRICK ERHAN TUKAYO
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真核表达质粒PcDNA3.1（+）-带有白蛋白信号肽的Vasostatin（120-180aa）的构建及其在体内外细胞中的表达
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2011 目的构建真核表达质粒PcDNA3.1（+）-带有白蛋白信号肽的Vasostatin（120-180aa）并了解其在体内外真核细胞中的表达。方法将带有白蛋白信号肽的Vasostatin（120-180aa）的逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）产物克隆至pcDNA3.1（+）真核表达载体上,经酶切鉴定及测序分析证明构建成功后,以脂质体介导法转染体外培养的真核293T细胞及注射入鼠骨骼肌细胞中,了解其在体内外真核细胞中的表达情况。结果我们获取了包含带有白蛋白信号肽的Vasostatin（120-180aa ...
刘建巨 +6 more
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Characterization of the expression patterns, transcriptional regulation, antimicrobial mechanisms and immune activities of SpHyastatin from Scylla paramamosain [PDF]
, 2015 拟穴青蟹（Scyllaparamamosain），简称青蟹，是我国东南沿海重要的经济养殖蟹类。迄今已有报道抗菌肽在青蟹抵抗海洋环境中病原微生物的入侵感染方面具有重要作用。抗菌肽广泛存在于自然界的生物中，是动物先天性免疫系统中的重要组分。自1996年甲壳类抗菌肽首次在岸蟹（Carcinusmaenas）中报道以来，已有几种抗菌肽在蟹类血淋巴系统和生殖系统中被发现，它们是蟹类重要的免疫因子。因此，青蟹中新抗菌肽的揭示对于深入阐明其免疫机制及其在复杂的环境中健康生存具有重要的科学意义和应用价值 ...
单忠国
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2010 目的构建pEGFP-N1/VEGF真核表达质粒,并进行鉴定。方法利用RT-PCR方法从组织中提取VEGF的基因片段,与pMD18-T载体连接,构建pMD18-T/VEGF重组质粒,酶切后与pEGFP-N1真核表达载体连接,构建pEGFP-N1/VEGF真核表达质粒,进行测序、酶切鉴定,表明质粒构建成功。结果本实验成功构建了pEGFP-N1/VEGF真核表达质粒。结论为进一步研究利用VEGF基因修饰骨组织工程骨,促进血管再生提供实验基础。
张明磊 +4 more
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