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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2009 目的构建靶向人SSH1L的siRNA真核表达载体（pSUPER-SSH1L）。方法将设计好的SSH1L的siRNA的寡聚脱氧核苷酸链与真核表达载体pSUPER连接,构建重组pSUPER-SSH1L真核表达载体。对该重组表达载体进行酶切鉴定及DNA测序;通过Western blot检测SSH1L蛋白的表达。结果酶切鉴定、DNA测序以及Western blot检测结果证实表达质粒构建成功,无碱基突变。结论成功构建了靶向人SSH1L基因表达的siRNA干扰质粒载体pSUPER-SSH1L ...
邢志军, 赵建武, 王岩, 高忠礼
doaj
人乳头瘤病毒18型E6蛋白真核表达载体的构建及其在子宫颈癌细胞株Hela细胞中的表达
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2010 目的构建并鉴定p3×flag-myc-CMV-24-HPV18E6真核表达载体,并转染Hela细胞后,检测其在Hela细胞中的表达。方法用RT-PCR法从Hela细胞中扩增出带HindⅢ、SalⅠ酶切位点的HPV18E6基因片段,将HPV18E6基因片段连接到pMD-18T载体上,通过限制性内切酶HindⅢ、SalⅠ酶切,T4连接酶连接到含有上述酶切位点的p3×flag-myc-CMV-24真核表达载体上,通过脂质体将p3×flag-myc-CMV-24-HPV18E6转染入Hela细胞48h后 ...
卫莹 +7 more
doaj
Studies of the regulatory mechanism on myocardial related genes of Rbm24 [PDF]
, 2015 实验目的 研究在心肌细胞分化和发育过程中，Rbm24蛋白发挥功能和产生的影响。寻找Rbm24结合的相关基因的不同水平的RNA，以及结合目的RNA后所发挥的功能，为降低Rbm24的表达导致扩张性心肌病等一系列心肌受损和功能紊乱相关疾病探究原因，寻找相关的信号通路，提供一定的实验及理论依据，为成功解决心脏疾病难题寻找重要的攻克点。 方法 通过Westernblot免疫印迹检测Rbm24和其他心肌相关蛋白在C2C12细胞分化中蛋白的表达情况 ...
杨康
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Study on the immune response patterns, enzymatic properties and apoptosis inducing functions of three cathepsins from Scylla paramamosain [PDF]
, 2017 拟穴青蟹（Scyllaparamamosain）是我国东南沿海地区重要的海水养殖蟹类，具备高营养价值和经济价值，但在养殖过程中容易遭受各种病害侵袭。近几年来，为了更好地进行病害防治，人们对青蟹自身免疫机制的研究逐渐增多。组织蛋白酶是一类溶酶体蛋白酶，广泛参与机体的各种生理过程，包括细胞内蛋白质降解、酶原和激素原的激活、免疫调节、炎症反应、细胞外基质重塑等，因此探索拟穴青蟹组织蛋白酶的功能特性对于深入了解甲壳动物先天性免疫防御机制具有重要意义。目前对于组织蛋白酶的研究多集中于哺乳动物 ...
朱可欣
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2007 目的构建HBsAg真核表达载体,转染CHO细胞并检测其表达。方法通过PCR法扩增出乙肝表面抗原的S基因和dhfr基因,分别克隆到T载体上,然后分别将S基因和dhfr基因克隆到pCI载体上,将pCI载体的CMV启动子替换为hEF-1α启动子。对新构建的pEF1-αS-dhfr真核表达载体进行酶切和测序鉴定。用脂质体法转染CHO（dhfr-）细胞,并用ELISA法检测HBsAg表达。结果hEF-1α启动子、S基因和dhfr基因经测序与Genbank报道一致。真核表达载体pEF1-αS ...
张艳, 时成波, 郭丽, 范洪学
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人FOXC2真核表达载体的构建及稳定转染C-33A细胞系的建立
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2009 目的构建人FOXC2真核表达载体,并转染人宫颈癌C-33A细胞,建立稳定转染的细胞系。方法应用PCR方法从人FOXC2克隆中扩增其cDNA编码区序列,并将其构建于pcDNA3.1（-）真核表达载体。经PCR和测序鉴定后,利用脂质体进行宫颈癌C-33A细胞的转染,应用G418筛选出稳定表达FOXC2的细胞系,通过RT-PCR及Westernblot法检测FOXC2的表达情况。结果成功构建pcDNA3.1（-）/FOXC2真核表达载体,建立稳定转染FOXC2的C-33A细胞系,并鉴定了FOXC2目的基因在C-
成荣杰, 付艳
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2010 目的构建HSV-TK单基因和TK/hIL12融合基因的真核表达载体。方法 PCR扩增质粒pGT60-hIL12中HSV-TK与hIL12治疗基因片段,同时引入pcDNA3.1（+）多克隆酶切位点,构建HSV-TK单基因及其与hIL12融合基因的真核表达载体。结果 DNA测序分析、限制性双酶切鉴定证实构建的真核表达载体中治疗基因的序列、大小和方向正确。结论成功构建了pcDNA3.1-TK和pcDNA3.1-TK/hIL12真核表达载体,为进一步探索HSV-TK与hIL12基因的协同抗瘤作用提供实验基础。
杜晓媛 +5 more
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Cloning and characterization of emp53 from Echinococcus multilocularis [PDF]
, 2015 泡状棘球蚴病(Alveolarechinococcosis，AE)是由棘球绦虫属的多房棘球绦虫(Echinococcusmulticularia，Em)幼虫寄生所致的人畜共患寄生虫病，该病被认为是最致命的蠕虫感染病。泡状棘球蚴在宿主体内生长就必须存在一套防御系统来抵御氧化损伤、维持基因组稳定以及细胞凋亡，肿瘤抑制基因p53被誉为“基因组的卫士”，在应对一系列的刺激和损伤时起了非常重要的作用。 尽管p53在细胞的增殖、分化或凋亡中具有重要的作用，但是到目前为止在寄生蠕虫领域还没有p53相关蛋白的研究报道 ...
朱山
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2006 目的构建人regucalcin（RGN）全长cDNA的真核表达载体,观察其在人肾皮质近曲小管上皮细胞（HK-2细胞）中表达。方法用RT-PCR技术扩增获得人HK-2细胞RGN全长cNDA,将扩增的产物连接入pMD18-T克隆载体上,将重组质粒转化入大肠杆菌DH5α内并提取质粒,双酶切鉴定、DNA测序鉴定准确,再用双酶切方法将RGN基因定向连接到真核表达载体pEGFP-N1中,构成pEGFP-RGN,将pEGFP-RGN转化入大肠杆菌DH5α内并提取质粒,双酶切鉴定、DNA测序鉴定准确 ...
徐洪 +4 more
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皱纹盘鲍HdhTPX2基因在毕赤酵母中的表达及抗氧化活性研究 [PDF]
, 2019 为研究皱纹盘鲍Haliotis discus hannai Ino硫氧还蛋白过氧化物酶（TPX2）蛋白的抗氧化活性,将HdhTPX2基因克隆至pPIC9K载体,通过电击转化至毕赤酵母GS115菌株中,获得重组表达质粒pPIC9K-HdhTPX2,经甲醇诱导及亲和层析纯化得到重组HdhTPX2蛋白,并进行质谱鉴定及体外抗氧化功能检测。结果表明:本研究中成功构建了重组毕赤酵母菌株GS115/pPIC9K-HdhTPX2,经表达条件的优化,在pH为7的培养基中用0.5%甲醇诱导表达72 h ...
乔琨 +9 more
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