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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2004 ［目的 l 构建人肝豆状核变性病ATP7B基因野生型及常见突变型的小鼠肝脏特异性表达载体 ALB-ATP7B, 为制备转基因小鼠及相关基因治疗作准备。【方法】定点突变法获取人群中常见的Arg778Leu及 Hisl069Gln两种ATP7B基因突变体，定向克隆将小鼠白蛋白启动子ALB序列及野生和突变的ATP7B基因亚克 隆至真核表达载体kbpala上， 得到可在小鼠肝脏特异性表达的人ATP7B基因正常及突变型真核表达载体 ALB-ATP7B。【结果】经测序及酶切鉴定证实， 真核表达载体ALB ...
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2010 目的构建核转录因子κB抑制蛋白激酶（inhibitor of kappa B kinase,IKK）β真核表达载体,以便进一步探讨其生物学作用。方法从人正常肝细胞L02中提取RNA,并利用IKKβ特异性引物通过RT-PCR方法扩增了IKKβcD-NA,并克隆入pcDNA3载体中,构建重组载体pcDNA3-IKKβ。将重组载体转染入HEK293细胞中,并通过免疫印迹方法检测IKKβ的表达。结果酶切及测序结果显示,重组质粒构建成功;免疫印迹结果显示 ...
张冬梅 +6 more
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Expression of the coat protein gene of IHHNV in shrimp in Pichia Pastoris [PDF]
, 2012 对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒是“须向OIE申报的甲壳动物重要疾病“之一。将该病毒主要结构蛋白基因克隆至毕赤酵母穿梭表达质粒PPIC9k,构建重组表达载体(命名为PPIC9k-IV),限制性内切酶bglⅡ对其进行酶切线性化,采用电穿孔法转化到毕赤酵母gS115宿主菌。采用PCr方法分析和g418筛选来鉴定重组的毕赤酵母,诱导表达的产物分别进行ElISA分析或WESTErn blOT免疫印迹鉴定,分泌表达产物分子量大小为40ku左右 ...
刘棠 +7 more
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hCAP-18/LL-37全长肽真核表达产物对树突状细胞分化成熟的影响
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2010 目的研究人源阳离子抗菌肽（hCAP）-18/LL-37全长肽真核表达产物对树突状细胞分化成熟的影响。方法将已构建的hCAP-18/LL-37全长肽真核表达载体pcDNA4/Myc-His-hCAP-18转染Hela细胞株,在转染后48 h收获培养上清;人外周血单个核细胞分离,体外定向诱导分化成树突状细胞（DC）;将转染后收获的培养上清与体外培养的DC共同孵育,48 h收获DC,经流式细胞仪检测DC表面分子CD83、CD86、CD40及HLA-DR的表达。结果FCM结果显示:pcDNA4/Myc-His ...
袁红艳, 许娜, 王凤丽, 常雅萍
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The mechanism and function of extracellular matrix protein Mindin in the colon cancer progression [PDF]
, 2015 在世界范围内，结直肠癌是临床上常见的恶性肿瘤之一。结肠癌的发病机制也在不断细致、深入的研究。然而结肠癌这种实体肿瘤不像单纯的肠癌细胞系。相反，它是由多种类型的细胞和细胞外基质组成的功能失调的器官。细胞外基质是肿瘤微环境的重要组成部分，包含各种各样的细胞因子和代谢产物，具有向细胞传导各种环境信号的作用。这些信号对于细胞生命过程的方方面面都必不可少，包括增殖、分化和死亡等。然而，细胞外基质蛋白在结肠癌发生发展的演变过程中的作用尚未完全明确。 分泌型的细胞外基质蛋白Mindin作为Mindin-F ...
肖传兴
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2009 目的在人骨髓间充质干细胞内大量稳定的表达人白血病抑制因子（human Leukemia Inhibitory Factor,hLIF）。方法应用RT-PCR方法从人蜕膜组织中扩增出白血病抑制因子,并将其构建于pcDNA3.1真核表达载体上。利用脂质体进行基因骨髓间充质干细胞的转染。利用G418进行基因的稳定表达筛选。通过RT-PCR和Western blot方法进行基因表达的检测。结果成功扩增出人白血病抑制因子基因,成功构建hLIF-pcDNA3.1真核表达载体。转染LIF-pcDNA3 ...
杨春辉, 杜珍武, 杨光, 尹维田
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Study of Pelo deficiency mediated antiviral activity [PDF]
, 2012 果蝇是研究抗病毒天然免疫以及病毒与宿主相互作用的理想模型。我们以果蝇C病毒（DrosophilaCVirus，DCV）为病原体对已有的突变体果蝇库进行筛选，找到了一个对DCV感染更为抵抗的果蝇株并鉴定出其体内Pelo基因的表达量下降。通过基因敲除和表型回复实验，我们证实了Pelo基因的缺失的确可以使果蝇对DCV的感染更为抵抗。此外，DCV以及其他多种病毒的复制在Pelo基因敲除型果蝇中都变慢，说明Pelo基因缺陷可能介导了广谱的抗病毒免疫。 我们研究发现，Pelo并不参与目前已知的果蝇抗病毒免疫途径 ...
吴秀榕
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2011 目的构建mB7-1真核表达载体并检测其在B16细胞中的瞬时表达情况。方法提取小鼠脾细胞mRNA,PCR法获得mB7-1片段,与pcDNA3连接,并进行酶切鉴定及测序。重组质粒经脂质体介导转染鼠B16细胞,检测基因表达情况。结果完成mB7-1-pcDNA3重组载体连接及鉴定,基因测序与Genebank一致,并转染至B16细胞,检测到基因表达。结论成功构建mB7-1-pcDNA3真核表达载体,获得mB7-1表达细胞系,为研究其抗瘤效应奠定了基础。
金洪娟, 王权, 所剑
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Effect of Beta-arrestin1 and TFF3 on Biological Characteristics of Human Gastric Cancer BGC-823 Cells [PDF]
, 2011 Beta-arrestin包括Beta-arrestin1和Beta-arrestin2两种蛋白，它们在体内广泛表达，可以调节G蛋白耦联受体（Gproteincoupledreceptor，GPCR）的脱敏和内吞，是多种信号通路中的多功能调节因子。TFF3是三叶因子家族（Trefoilfactors-TFFs）成员之一，TFFs是主要由胃肠道黏液细胞分泌的可溶性小分子多肽，它们在慢性炎症、黏膜保护修复、细胞凋亡、组织化生及肿瘤的发生发展等方面具有重要的生物学功能。本实验首次在胃癌细胞BGC ...
王璐
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人DNA 聚合酶β 全长cDNA 的克隆、鉴定及真核表达载体的构建
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2002 【目的】克隆人类DNA 聚合酶(pol-β)基因全长cDNA, 构建该基因的真核高效表达载体。【方法】抽提人胚肺纤 维细胞HLF 总RNA 进行RT-PCR 扩增, 用pGEM-T 载体经T/A 克隆、DNA 测序确定后, 用双酶切将pol-β 全长cDNA 定向 克隆到绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-C1 , 转染大肠杆菌DH5α, 筛选阳性克隆, 双酶切鉴定重组质粒。【结果】经RT-PCR 获 得1.03 kb 的产物, 经DNA 测序, 确定所扩增片段为人类pol-β 基因全长cDNA ...
杜柳涛, 高 昆, 何 云
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