Results 61 to 70 of about 3,860 (145)
Construction of polybutycyanocrylate nanoparticles(PBCA-NPs) loaded P16a gene and expression in Hep-2 cell [PDF]
目的制备携带P16A基因的聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒并在喉癌细胞中进行表达。方法选用乳化聚合法制备PbCA-nPS,以激光粒度分析仪及透射电子显微镜分析纳米粒的形态和粒径。用阳离子表面活性剂十六烷基三乙基溴化铵(CTAb)对纳米粒进行表面修饰。构建真核表达载体PIrES2-EgfP-P16A经过酶切鉴定及测序后与PbCA-nPS连接,转染喉癌细胞HEP-2,荧光显微镜检测转染效率,蛋白印迹法检验P16A基因的表达,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果所制PbCA-nPS粒径均匀、zETA电位较高,较为理想 ...
周燚, 赵德安, 骆启聪
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Cdc42-shRNA表达载体的构建及在肝癌细胞株的沉默效果
目的构建Cdc42-shRNA真核表达载体。方法合成Cdc42的基因干扰序列并定向插入到RNA干扰(RNAi)真核表达载体pGenesil-1质粒,通过测序进行鉴定。干扰质粒经脂质体Lipofectamine2000介导转染肝癌细胞,Westernblot方法检测沉默效率。结果测序证明干扰序列完全正确,Westernblot结果显示Cdc42-shRNA对肝癌细胞株内源性Cdc42有较好的沉默效果。结论成功构建了Cdc42-shRNA真核表达载体,为进一步研究Cdc42在基因治疗中的作用奠定基础。
解英俊 +3 more
doaj
Recombinant production, antimicrobial and antiviral activities of both Scygonadin from Scylla paramamosain and hybrid peptide Scy-hepc [PDF]
抗菌肽(antimicrobialpeptide)是先天性免疫的重要组分,广泛存在于生物界的各个门类,进化上相对保守,具有广谱的抗菌、抗病毒和抗肿瘤等作用。抗菌肽具有可见的应用前景,但直接从动物体提取抗菌肽不适于未来产业化的要求。本研究利用本实验室分离鉴定的拟穴青蟹抗菌肽Scygonadin基因和大黄鱼抗菌肽Hepcidin基因,通过基因工程技术构建了Scygonadin基因及与大黄鱼抗菌肽Hepcidin基因联合的基因工程稳定表达菌株,优化其表达与纯化工艺,研究其基因表达产物的抗菌与抗病毒活性 ...
彭会
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Molecular characterization and immune activity of an anti-lipopolysacchride factor from red claw crayfish Cherax quadricarinatus [PDF]
对虾白斑综合症病毒(Whitespotsyndromevirus,WSSV)的宿主范围广泛,能感染绝大多数的虾蟹类,是虾蟹类水产养殖业的主要病原,传染力强,致死率高,给全球水产养殖业造成了巨大的经济损失。由于对WSSV的致病机理知之甚少,至今为止仍未找到一个行之有效的方法根治WSSV。在课题组的前期研究中,从WSSV感染的红螯螯虾(Cheraxquadricarinatus)造血组织(Haematopoietictissue,Hpt)细胞差异基因表达谱中筛选到了两种抗脂多糖因子(Anti ...
林凤瑜
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鼠白细胞介素-2 受体 α 、β链基因反义 RNA 真核表达质粒的构建
【目的】构建鼠 IL-2R α与β 链基因的反义 RNA 真核表达质粒, 为反义 RNA 基因治疗细胞免疫相关疾病作准备。 【方法】用限制性内切酶从克隆载体上切下鼠 IL-2R α与β 链cDNA 及鼠 IL-2启动子, 克隆入真核表达质粒 pcDNA3 的多克隆 位点上,用酶切或 PCR 法鉴定正反连接。【结果】得到 4 个反向连接的重组质粒: pcAnti-mIL-2Rα , pcAnti-mIL-2Rβ ,pcAntim IL-2Rα β 及 pciAnti-mIL-2Rα β 。前三者由CMV ...
何承伟, 马涧泉
doaj
Optimizing condition of efficient high-expression of lipase B in Pichia pastoris and enzymatic kinetic study [PDF]
脂肪酶B是一种用途较为广泛的脂肪酶,能够催化甘油三酯酯键的断裂。除此之外,脂肪酶B还具有多种酶活性,对非水溶性和水溶性物质都有很强的催化活性。因其催化功能的多样性及作为一种生物催化剂的优越性,脂肪酶B在许多领域中具有广泛的应用。随着基因工程和发酵工程等生物技术的不断发展,微生物脂肪酶在各行各业中都得到了广泛应用。而毕赤酵母作为一种能够高效表达外源蛋白的真核表达系统,可以高效表达外源脂肪酶,为其工业化生产提供了基础。本论文以重组毕赤酵母表达脂肪酶B为研究目标 ...
魏常锦
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激活素受体相互作用蛋白ARIPzip真核表达载体的构建及表达
目的构建激活素受体相互作用蛋白(activin receptor interacting protein zip,ARIPzip)真核表达载体,以便进一步探讨其生物学作用。方法从小鼠成纤维细胞3T3中提取RNA,并利用ARIPzip特异性引物通过RT-PCR方法扩增了ARIPzip cDNA,并克隆入pcDNA-Flag载体中,构建重组载体pcDNA-F-ARIPzip。将重组载体转染入HEK293细胞中,并通过免疫印迹方法检测ARIPzip的表达。结果酶切及测序结果显示,重组质粒构建成功 ...
裴颖 +7 more
doaj
随着科学技术的发展,重金属离子污染越来越严重,严重危及人类健康和安全。如何降低重金属对人体危害已成为目前亟待解决安全性问题之一。金属硫蛋白(MT)作为高效的天然解毒剂,一直是生物学与医学领域中基础研究和应用研究的热点之一,并在医学、化妆品、保健食品添加剂、环保等方面得到了广泛的应用。目前,国内市场上常见的MT多数是从兔肝脏中提纯,由于MT原料需求特别,MT原料来源已成为制约该领域发展的瓶颈之一。利用原核大肠杆菌作为表达宿主,采用基因重组和发酵技术是获得大量高纯MT的重要途径之一 ...
阎光宇
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目的构建卵巢特异启动子-1(ovarian-specific promoter,OSP-1)调控白介素-24基因(Interleukin-24,IL-24)表达的真核表达载体。方法通过RT-PCR方法从人外周血基因组中扩增IL-24基因片段,应用基因重组技术将0SP-1启动子片段插入到pcDNA3.0真核表达载体,替换pcDNA3.0载体的CMV启动子与增强子序列,然后将克隆的IL-24基因片段插入到pcDNA3.0-OSP-1载体的OSP-1启动子的下游,从而构建成由OSP-1启动子调控IL ...
祝贺 +4 more
doaj
Characterization of a Novel Alternatively Spliced Variant from Human FMR1 Gene and Function of Its Encoded Product [PDF]
脆性X智力障碍1基因(fragileXmentalretardation1gene,FMR1)编码一个选择性RNA结合蛋白,称脆性X智力低下蛋白(fragileXmentalretardationprotein,FMRP)。该蛋白表达减少或缺失可导致一种常见的遗传性智力缺陷疾病,称脆性X综合征(fragileXsyndrome,FXS)。FMR1基因的可变剪接与FMRP蛋白表达关系密切。不同的剪接方式会产生不同的转录本,最后导致FMRP蛋白的结构和功能发生改变,且相应的信号通路也受到影响 ...
杨文静
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