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The Role of BIN1 in Alzheimer’s Disease [PDF]
, 2015 阿尔茨海默症（Alzheimer’sdisease,AD）是与年龄相关的神经退行性疾病，其主要的病理学特征为由β-淀粉样蛋白(-amyloid,Aβ)聚集产生的老年斑（senileplaues,SP）以及由异常磷酸化的tau蛋白组成的神经纤维缠结（neurofibrillarytangles,NFTs）。Aβ是由淀粉样前体蛋白（-amyloidprecursorprotein,APP）经过β-分泌酶和γ-分泌酶的依次顺序剪切而产生 ...
牛萌萌
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2011 目的构建靶向增强型绿色荧光蛋白基因（EGFP）的RNA干扰质粒载体。方法设计并合成针对EGFP编码区的模板寡核苷酸单链,克隆入pSilencerTM 3.1-H1 neo载体中,对重组质粒进行酶切鉴定和DNA序列测定。结果重组质粒经限制性内切酶酶切得到66 bp和4.3 kb条带;重组阳性克隆测序结果与实验设计的模板寡核苷酸序列相符。结论成功构建靶向EGFP的RNA干扰表达载体,为RNA干扰技术在实验室的进一步开展奠定基础。
干惠珠 +5 more
doaj
p32 regulates ULK1 stability and autophagy [PDF]
, 2015 细胞自噬是细胞在营养匮乏条件下，降解细胞内成分以维持细胞必要活动与生命的一种细胞进程。线粒体自噬是一种选择性的细胞自噬，功能紊乱的线粒体可以通过这种方式被自噬体降解。并且线粒体自噬代表了线粒体质量控制的一种方式，而这种方式对维持最佳的线粒体生物能学水平很重要。大量的研究都表明了，ULK1在诱导细胞自噬与线粒体自噬中的关键作用，但是关于ULK1自身调节的报道却很少。p32是一个具有分子伴侣功能的蛋白，在维持线粒体膜电位差以及氧化磷酸化中起到非常重要的作用。但是p32与线粒体稳态控制的关系却没有被研究清楚 ...
焦海峰
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Cdc42-shRNA表达载体的构建及在肝癌细胞株的沉默效果
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2010 目的构建Cdc42-shRNA真核表达载体。方法合成Cdc42的基因干扰序列并定向插入到RNA干扰（RNAi）真核表达载体pGenesil-1质粒,通过测序进行鉴定。干扰质粒经脂质体Lipofectamine2000介导转染肝癌细胞,Westernblot方法检测沉默效率。结果测序证明干扰序列完全正确,Westernblot结果显示Cdc42-shRNA对肝癌细胞株内源性Cdc42有较好的沉默效果。结论成功构建了Cdc42-shRNA真核表达载体,为进一步研究Cdc42在基因治疗中的作用奠定基础。
解英俊 +3 more
doaj
Roles of AC-cathB-1, a Cathepsin B-like Cysteine Protease of Angiostrongylus cantonensis, in Host Gut Invasion [PDF]
, 2015 广州管圆线虫是引起嗜酸性粒细胞增多性脑膜炎和脑膜脑炎的主要病原生物，该病也因此被命名为广州管圆线虫病。广州管圆虫属于管圆线虫属，中间宿主为软体动物，终末宿主为啮齿类动物，人因误食未煮熟的携带其第三期幼虫（L3）的软体动物而意外感染，L3污染的其他食物或水源也可导致感染。近年来，随着人们饮食习惯的改变和水陆交通日趋发达，该病的流行呈上升趋势。然而，我们在其诊断和治疗方面仍缺乏有效手段，因此对其的进一步研究很有必要。 小肠壁作为机体防御病原体入侵的天然屏障之一 ...
龙瀛
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2016 目的构建重组HDAC1基因的短发夹RNA（shRNA）慢病毒干扰质粒并研究其对卵巢癌COC1细胞HDAC1表达的影响。方法针对HDAC1基因设计特异性siRNA靶点,构建慢病毒干扰质粒载体,筛选获得的有效shRNA慢病毒干扰序列,将其转染卵巢癌COC1细胞。采用Real-time PCR方法检测靶基因在mRNA水平的沉默效果,Western blot方法检测靶基因在蛋白质水平的沉默效果。结果构建的慢病毒载体shRNA的PCR鉴定和测序正确 ...
贾妍, 邹颖刚, 许天敏, 崔满华
doaj
Study on establisment of chicken embryo RNAi technology with infective feature of RCAS and Vezf1 function in chicken vascular development. [PDF]
, 2012 早期初级血管网络的形成，始于胚胎中胚层形成过程中其部分细胞分化为血管内皮前体细胞。血管内皮前体细胞再进一步向血管内皮细胞分化并形成初级毛细血管网，血管内皮细胞与其周围细胞进一步相互作用，逐步进行对初级血管的改建和生成新的血管，最终完成血管系统的发育。因此，血管内皮细胞是血管生成的中心细胞。为研究胚胎血管内皮细胞分化机制，先前我们从发育至三体节的鸡内皮前体细胞（VEGFR2+）相对特异表达基因的克隆中，发现了鸡的Vezf1(cVezf1)基因。该基因与在小鼠中发现的Vezf1基因高度同源 ...
张超
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2006 目的构建基质金属蛋白酶-26（MMP-26）小干扰RNA（siRNA）表达质粒,以研究其对人肿瘤细胞MMP-26基因表达的沉默效果,探索肿瘤基因治疗的新途径。方法根据MMP-26基因mRNA序列,设计有小发夹结构的3条寡核苷酸序列,克隆到空载体pSUPERIOR.puro中,构建重组质粒,同时设计构建分别针对GFP和-βactin的干扰质粒作为阴性对照和阳性对照,并进行酶切鉴定和测序分析。结果酶切及测序证实重组质粒构建成功。结论利用RNA干扰（RNAi）技术可成功构建siRNA表达载体。
张扬 +4 more
doaj
CRISPR/Cas9 mediated genome editing and construction of sgRNA efficiency testing system in C. elegans [PDF]
, 2015 CRISPR/Cas9做为第三代人工核酸内切酶，由于其操作简单、特异性强、及效率高的特性，目前已被广泛用于多种生物的基因组编辑。CRISPR/Cas9介导的基因编辑技术不仅可以用于基因敲除，而且也可以用于精确的基因插入，成为基因功能研究非常有前途的工具。在短短的两年里，已有二十几篇文章先后报道了在秀丽隐杆线虫中利用CRISPR/Cas9对不同基因进行的精确编辑。 本研究中，我们利用CRISPR/Cas9系统，通过Cas9切割导致DNA断裂诱导同源重组，在对dpy-13基因敲除的同时，成功进行了1 ...
张丹丹
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HER2基因RNA干扰质粒对SK-BR-3细胞增殖及凋亡的影响
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2011 目的探讨HER2基因高效RNA干扰质粒转染到SK-BR-3乳腺癌细胞后,对细胞的增殖及其凋亡的影响。方法采用脂质体转染法将针对HER2基因的高效RNA干扰质粒转染至乳腺癌细胞SK-BR-3中,通过细胞计数、MTT比色法、流式细胞术和Western blot检测PCNA增殖细胞核抗原,分析检测其对SK-BR-3细胞增殖、凋亡的影响。结果 MTT比色测定显示,HER2-shRNA2干扰质粒转染到SK-BR-3细胞后在48 h后现抑制,与空白对照组比抑制率分别为48 h 16.53%7、2h 39.03%9 ...
韩冬, 徐煌, 李文浩, 张成文
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