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CRISPR/Cas9 mediated genome editing and construction of sgRNA efficiency testing system in C. elegans [PDF]
, 2015 CRISPR/Cas9做为第三代人工核酸内切酶，由于其操作简单、特异性强、及效率高的特性，目前已被广泛用于多种生物的基因组编辑。CRISPR/Cas9介导的基因编辑技术不仅可以用于基因敲除，而且也可以用于精确的基因插入，成为基因功能研究非常有前途的工具。在短短的两年里，已有二十几篇文章先后报道了在秀丽隐杆线虫中利用CRISPR/Cas9对不同基因进行的精确编辑。 本研究中，我们利用CRISPR/Cas9系统，通过Cas9切割导致DNA断裂诱导同源重组，在对dpy-13基因敲除的同时，成功进行了1 ...
张丹丹
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乳腺癌生存期相关长非编码 MAPT-AS1 及其共表达基因筛选与验证
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2019 【目的】筛选乳腺癌患者生存期相关差异表达长链非编码RNA（lncRNA）及其共表达基因，并验证其乳腺癌细胞中的表达情况。【方法】通过TCGA数据库筛选943例RNA-seq数据信息：（837例乳腺癌患者+106例正常对照），发现长非编码MAPT-AS1高表达，乳腺癌患者生存期更长。构建长非编码MAPT-AS1过表达和干扰质粒，将构建好的质粒转染乳腺癌细胞株T47D，并用嘌呤霉素筛选出稳定表达的T47D细胞株，通过RT-qPCR验证长非编码MAPT-AS1及其共表达基因的表达情况。【结果 ...
许家瑞 +6 more
doaj
c-Src promotes tumor cell proliferation by activating HK2 [PDF]
, 2015 大多数肿瘤细胞即使在氧气充足的情况下依然主要靠糖酵解方式提供能量，这就是著名的Warburg效应，它是肿瘤代谢的一个重要特征。己糖激酶（hexokinase，HK）是糖酵解过程中的第一个限速酶。在哺乳动物体内，HK主要有四种亚型，即HK1、HK2、HK3和HK4，其中HK2与肿瘤的关系最为密切。目前研究表明Warburg效应的发生与原癌基因（如Ras，c-Myc，HIF-1）的过度激活和抑癌基因(如p53)的失活密切相关。c-Src是哺乳动物中最早发现的原癌基因 ...
王随利
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2006 目的利用小片段干扰RNA（siRNA）在肝癌细胞内诱导RNA干扰（RNAi）,抑制细胞间粘附分子-1（ICAM-1）基因表达,在体外进行RNAi对肝癌治疗的实验研究。方法根据ICAM-1基因设计shRNA片断,构建pGenesil-1/ICAM-1表达载体,转入E.coli菌,并用Lipofectamine tm2000转染HepG2细胞,通过MTT方法检测细胞活性状态,应用免疫组织化学的方法检测肝癌细胞中ICAM-1基因蛋白质表达抑制情况。结果本实验已成功构建了针对ICAM-1基因的pGenesil ...
廖维甲 +5 more
doaj
The role of TNFAIP8 family in gastric cancer and heart transplantation [PDF]
, 2016 摘要 目的：TIPE及TIPE2是TNFAIP8（Tumornecrosisfactor-αinducedprotein-8，TIPE，TNFAIP8）家族的重要成员，TIPE是调控凋亡进程的重要分子，本研究之一是应用TIPE不同表达的BGC823细胞株建立胃癌裸鼠移植瘤模型，观察TIPE对移植瘤生长的影响；同时收集并检测胃癌临床标本TIPE的表达特点，分析TIPE与胃癌临床病理特征的关系，明确TIPE与胃癌生物学行为的关系及对胃癌生长的影响。 TIPE2为免疫负性调控因子，对免疫稳态的维持起重要作用 ...
洪诗福
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2010 目的研究RNA干扰（RNAi）对BEL7402细胞的N-ras基因表达的干扰效应。方法建立装载靶向N-ras基因小干扰性RNA（siRNA）的表达载体;用脂质体法将此表达载体转染BEL7402细胞株,以转染空载细胞作为对照;采用RT-PCR和Western blot检测N-ras基因的表达;流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果转染siRNA的表达载体可以抑制内源N-ras基因在转录和转译上的表达。N-ras基因的表达抑制与BEL7402细胞的凋亡相关联。结论转染siR ...
赵岳 +4 more
doaj
The Effects and Mechanisms of JMJD1A on Colorectal Tumorigenesis [PDF]
, 2015 结直肠癌（colorectalcancer，CRC）是当今世界高发恶性肿瘤之一，多数由散发腺瘤阶段性发展而来，少数结肠癌的发生呈家族性聚集现象或由炎性肠病诱导发生。对结肠癌的早期筛查与诊断是结肠癌防治重点，由于结肠癌患者个体间差异性大，对靶向药物的开发是未来结肠癌治疗的重要辅助手段。 组蛋白去甲基化酶JMJD1A(Jumonjidomaincontaining1A)通过羟基化作用使组蛋白赖氨酸去甲基进而行使转录调节功能，参与精子生成、能量代谢、干细胞更新调控，也参与低氧诱导下的肿瘤调控 ...
苗萌萌
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Study on the mechanisms of Pygopus-2 promoting invasion and metastasis in hepatocellular carcinoma [PDF]
, 2016 第一部分Pygopus-2在HCC中高表达与病人恶性预后密切相关 Pygopus-2是经典Wnt/β-Catenin信号通路转录复合体的重要成分。本研究目的是观察在原发性肝癌中Pygopus-2的表达情况及相关的临床病理意义。RT-PCR的方法检测50对肝癌病人组织标本中癌组织与癌旁组织中Pygopus-2的mRNA表达情况，结果发现癌组织中Pygopus-2的mRNA水平明显高于癌旁组织(P=0.009)。免疫组化分析显示异常表达的Pygopus-2蛋白与肝癌病人的年龄(P=0.025)、肿瘤大小(P=
李杰
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2007 【目的】以人包皮成纤维细胞（HFF）为模型,通过系统比较针对不同靶点的小干扰RNA（siRNA）对酸性鞘磷脂酶1（SMPD1）基因的沉默效果,筛选获得最有效的小干扰RNA序列,同时观察沉默SMPD1对细胞凋亡的保护作用。【方法】设计合成三对靶向SMPD1基因的小干扰RNA作为实验组,同时设立阴性对照组和脂质体组（lipofectamine 2000）,瞬时转染原代培养的HFF细胞,采用荧光定量RT-PCR法及Western blot测定SMPD1表达抑制情况,并用化疗药物丝裂霉素诱导细胞凋亡 ...
高军, 周灿权, 张仁礼, 马芸
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Function and mechanism of Repulsive Guidance Molecule RGMb/Dragon during Colorectal Cancer progression [PDF]
, 2016 结直肠癌是我国甚至全球范围内最常见的肿瘤之一，也是肿瘤相关死亡的主要原因之一。及时而有效的诊断是降低结直肠癌死亡率的重要措施。除了临床上常规的诊断及治疗方法外，人们也在不断致力于新型肿瘤标志物的研究，以进一步明确结直肠癌发生发展的机制。排斥导向分子(RGM)家族成员RGMb，又名Dragon，作为骨形态发生蛋白(Bonemorphogeneticprotein，BMP)通路的辅助受体，不但承载着胚胎发生、神经修复和肾脏正常生理功能，还与各种上皮来源肿瘤的发生发展密切相关。然而，RGMb ...
施颖
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