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目的探讨siRNA对人肝癌HepG2细胞MDM2基因表达的抑制作用及对增殖的影响。方法体外合成针对MDM2基因的siRNA质粒,转染HepG2细胞株;应用RT-PCR和western blot方法检测siRNA对MDM2和P53基因和蛋白表达的影响,并用MTT法检测siRNA对细胞增殖抑制作用,流式细胞仪检测细胞周期。结果和空白组比转染siMDM2-1,2的HepG2细胞的MDM2基因和蛋白表达减低,而P53基因和蛋白表达增加。阴性对照质粒组的基因表达未见明显改变。转染siRNA ...
赵燕颖 +4 more
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【目的】 制备稳定性好?包封率高?缓释性能优的哌仑西平脂质体?【方法】采用均匀设计等方法筛选制备哌仑西平脂质体的处方和工艺,并对其形态?粒径?包封率?加速实验结果及体外释放规律进行考察?【结果】 制得的哌仑西平脂质体为单层脂质体,平均粒径为480 nm,包封率为77.24%±9.83%,其稳定性好,缓释效果优于哌仑西平磷酸缓冲液?【结论 ...
戴淑真
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目的研究siRNA对人胶质瘤U251细胞MDM2基因表达的抑制作用及对肿瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法体外合成2对针对MDM2基因的siRNA,经脂质体转染导入U251细胞;用半定量RT-PCR检测siRNA MDM2对MDM2基因表达的抑制作用;并用MTT法检测siRNA MDM2对细胞增殖抑制作用,流式细胞仪检测细胞凋亡。结果转染siRNA MDM2的细胞的MDM2基因表达分别下调到对照组的31.61%和40.18%;转染阴性对照质粒的MDM2基因没有明显改变。MTT结果表明转染siRNA ...
张舵舵 +4 more
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Impact of p38MAPK and RGS16 to the apoptosis and cell cycle of the glioma C6 cells [PDF]
目的 探讨p38MAPK和RGS16对大鼠胶质瘤C6细胞的生物学特性的影响 .方法 利用脂质体介导法将p38MAPK和RGS16基因分别或共转染导入C6细胞中 ;用p38MAPK抑制剂SB 2 0 2 190处理处于对数生长期的转染和未转染 p38MAPK的C6细胞 ,2 4~ 36h后在倒置显微镜下观察细胞形态变化和贴壁情况 ;免疫细胞化学法检测转染前后p38MAPK和RGS16蛋白的表达情况 ;流式细胞仪检测细胞周期变化和细胞是否有凋亡发生 .结果 转染 pCMV5 p38和 /或pCMV5 ...
张丰(第四军医大学西京医院病理科) +4 more
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Role of Nrf2/ARE in chemoprevention of cancer [PDF]
化学致癌过程是涉及启动、促进和进展等多阶段的复杂过程。癌症的化学预防是应用天然的或合成的化学物质,以阻断、抑制或其癌变过程,从而达到预防肿瘤的目的。化学致癌物的体内生物转化依靠肝脏的Ⅰ相和Ⅱ相代谢相酶来完成。作为对化学预防剂的应答反应,碱性亮氨酸拉链蛋白家族成员转录因子Nrf2首先从胞质蛋白Keap1上解离,然后发生核内转位,与Ⅱ相代谢酶基因上游的抗氧化反应元件结合诱导Ⅱ相代谢酶基因的表达,这是化学防癌的重要机制;Nrf2/ARE对Ⅱ相代谢酶的调节涉及PI3K、MAPK、PKC等细胞内重要信号传导途径 ...
侯振清 +3 more
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The Construction of Targeted Gene Therapy Vector and Its Cytoxicity on The Colorectal Carcinoma Cells [PDF]
目的: 构建由癌胚抗原启动子(CEApromoter,Cp)驱动的双自杀基因CD-TK治疗载体pcDNA3.1(-)Cp-CD-TK,研究癌胚抗原启动子能否控制CD-TK基因在CEA阳性大肠癌细胞中专一性表达和杀伤,比较融合基因与单基因对肿瘤细胞生长抑制方面有无差异,是否存在协同效应,并确定安全有效的药物使用浓度。观察旁观者效应。 方法: 分别以提取的人血细胞基因组DNA,pMD18-CD质粒和tgCMV/Hy-TK质粒为模板,PCR扩增Cp、CD和TK基因片段,采用双酶切、连接等方法依次将Cp、CD ...
黄琳
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腺病毒介导的BMP-2基因转染骨髓基质干细胞及种植异种骨支架的体外观察
目的 用人骨形态发生蛋白 2腺病毒表达载体 (Ad BMP 2 )转染的兔骨髓基质干细胞 (BMSC) ,种植BCB(去抗原牛松质骨 )支架体外构建组织工程骨。方法 蛋白印迹法检测转染后细胞BMP 2的表达 ,ALP活性检测分析基因转染对细胞分化的影响。然后将转染后细胞接种到BCB支架上 ,扫描电镜观察细胞贴附、生长状况。结果 转染后 ,BMSC表达BMP 2 ,ALP活性明显增高。扫描电镜见转染细胞分布均匀 ,伸展良好。结论 Ad BMP 2可高效转染BM SC ,且促进细胞分化 ...
景元海 +4 more
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The role of small GTPases in the regulation of intracellular transport of cardiac sodium channel (Nav1.5) [PDF]
摘要 目的:小G蛋白在调控蛋白转运过程中发挥重要作用。近年来,小G蛋白对心肌离子通道(膜蛋白)的调控作用日益受到重视,目前相关的研究主要集中在钾离子通道和钙离子通道的调控方面,但到目前为止,未见有关小G蛋白通过调控囊泡运输影响心肌纳离子通道表达和功能的文献报道。本项目拟分别在异体细胞(HEK293细胞过表达Nav1.5),通过定量(Westernblot)、定位(confocal),研究小G蛋白Sar1和Arf1对纳通道蛋白转运的调控模式,为研究SCN5A基因(Nav1.5 ...
HUSSEN AMIR AHMED MANSAI
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K7M2细胞转染Runx2基因后对MC3T3细胞RANKL基因表达的影响
目的探讨转染Runx2基因后对RANKL及相关细胞因子的影响。方法将鼠骨肉瘤K7M2细胞分成3组,K7M2组,K7M2-neo组和K7M2-Runx2组,应用Westernblot方法检测转染是否成功,选择转染成功的细胞连同K7M2组,K7M2-neo组细胞,应用ELISA方法检测培养上清液中的IL-1α,IL-6,IL-11和PGE2的含量变化,并应用RT-PCR的方法检测应用K7M2组,K7M2-neo组和K7M2-Runx2组以及在K7M2-Runx2组细胞中加入IL ...
吴丹凯 +6 more
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目的: 研究小鼠 B7 基因转染对小鼠肝癌细胞 Hepal-6 细胞株细胞形态、生长速度及致瘤性的影响。方法: 用逆转录病毒载体,将 小鼠B7 基因导入小鼠肝癌细胞 Hepal-6 细胞株中,经G418 筛选,获得高表达 B7分子的阳性细胞克隆,采用CTLA-4Ig 的间接免疫荧光法检测 B7 分子的表达情况,并观察了B7 基因转染对细胞形态、生长速度及致瘤性的影响。结果:①亲本小鼠肝癌细胞株 Hepal-6 不表达 B7 分子,转 染 B7 基因的 Hepal-6 细胞高表达 B7 分子;②转染 B7
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