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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2009 目的构建人紧密连接蛋白claudin-6的cDNA真核表达载体。方法应用RT-PCR、T-A克隆、限制性内切酶切及亚克隆等技术将claudin-6基因全长克隆入真核表达载体pcDNA3.1（+）质粒中。结果酶切鉴定、PCR扩增以及序列分析表明已经将claudin-6基因全长序列克隆入真核表达载体pcDNA3.1（+）质粒中。结论获得了人claudin-6基因的全长cDNA片段,构建了claudin-6原核克隆载体和真核表达载体。实验中发现,中国人claudin-6基因的461位点碱基为A ...
吴琼 +7 more
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含副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus) Fla I基因真核表达重组质粒的构建 [PDF]
, 2002 用ClaⅠ /EcoRⅠ双酶切带有副溶血弧菌 (Vibrioparahaemolyticus)极鞭毛蛋白FlaI基因的质粒pMD18 FlaI,回收目的基因片段 ,插入到真核细胞表达载体pIRESneo同样经ClaⅠ /EcoRⅠ切开的窗口中 ,成功地将FlaI克隆到pIRESneo中 ,获得有意义的重组质粒pIRESneo FlaI.构建的pIRESneo FlaI真核表达重组质粒 ...
丁少雄 +5 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2010 目的构建HSV-TK单基因和TK/hIL12融合基因的真核表达载体。方法 PCR扩增质粒pGT60-hIL12中HSV-TK与hIL12治疗基因片段,同时引入pcDNA3.1（+）多克隆酶切位点,构建HSV-TK单基因及其与hIL12融合基因的真核表达载体。结果 DNA测序分析、限制性双酶切鉴定证实构建的真核表达载体中治疗基因的序列、大小和方向正确。结论成功构建了pcDNA3.1-TK和pcDNA3.1-TK/hIL12真核表达载体,为进一步探索HSV-TK与hIL12基因的协同抗瘤作用提供实验基础。
杜晓媛 +5 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2007 目的探讨PAI的发卡样siRNA真核表达载体PAI siRNA对人肝癌HpG2细胞VEGF表达的影响。方法设计短发夹状PAI siRNA的寡核苷酸链,将其插入到真核细胞表达载体pSilencerTM 2.1-U6 neo载体中,构建的重组载体后;采用脂质体转染方法将构建的重组载体导入人肝癌细胞HpG2中,采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）、westernblot法分别检测转染细胞PAI mRNA和蛋白的表达变化以及对VEGF表达的影响。结果经测序证明PAI siRNA序列正确;转染PAI ...
杜建时, 赵晴, 张静菊, 王嘉桔
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2011 目的构建（BbxⅡ）基因真核表达载体,为研究家蚕素Ⅱ在哺乳动物细胞中的生物学作用奠定基础。方法以含有BbxⅡcDNA的PUC57质粒为模板,采用聚合酶链式反应（PCR）扩增BbxⅡcDNA片段。真核表达载体PcD-NA3.1及PCR产物经双酶切后连接,转化大肠杆菌DH-5α感受态菌,获得重组载体PcDNA3.1-Bbx/His,进行酶切鉴定和测序鉴定。结果 PCR获得与预期大小一致约300 bp的特异性DNA,重组载体PcDNA3.1-BbxⅡ/His经双酶切及测序鉴定证实 ...
李洪霞 +5 more
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Study of hnRNPA1 and TFF3 on the biological function of BGC-823 cells [PDF]
, 2011 胃癌是我国常见的恶性肿瘤之一，肿瘤的形成以及恶变，是一个涉及多种癌基因和抑癌基因参与作用的复杂病理过程。TFF3是三叶因子家族成员之一，是一种小分子粘膜分泌蛋白，其与胃癌的关系以及在粘膜上皮细胞中的重建作用已经成为大家关心和研究的热点之一。hnRNPA1在RNA调节中的作用及其在细胞凋亡和增殖等肿瘤发生、发展机制中的作用，表明其与肿瘤的形成和发展息息相关。本实验首次在胃癌细胞系BGC823中探讨TFF3与hnRNPA1肿瘤细胞生物学功能的影响，并进行二者结合性的初步探讨。 本实验通过构建Myc ...
王海星
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人FOXC2真核表达载体的构建及稳定转染C-33A细胞系的建立
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2009 目的构建人FOXC2真核表达载体,并转染人宫颈癌C-33A细胞,建立稳定转染的细胞系。方法应用PCR方法从人FOXC2克隆中扩增其cDNA编码区序列,并将其构建于pcDNA3.1（-）真核表达载体。经PCR和测序鉴定后,利用脂质体进行宫颈癌C-33A细胞的转染,应用G418筛选出稳定表达FOXC2的细胞系,通过RT-PCR及Westernblot法检测FOXC2的表达情况。结果成功构建pcDNA3.1（-）/FOXC2真核表达载体,建立稳定转染FOXC2的C-33A细胞系,并鉴定了FOXC2目的基因在C-
成荣杰, 付艳
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Characterization of a Novel Alternatively Spliced Variant from Human FMR1 Gene and Function of Its Encoded Product [PDF]
, 2017 脆性X智力障碍1基因（fragileXmentalretardation1gene，FMR1）编码一个选择性RNA结合蛋白，称脆性X智力低下蛋白(fragileXmentalretardationprotein，FMRP)。该蛋白表达减少或缺失可导致一种常见的遗传性智力缺陷疾病，称脆性X综合征（fragileXsyndrome，FXS）。FMR1基因的可变剪接与FMRP蛋白表达关系密切。不同的剪接方式会产生不同的转录本，最后导致FMRP蛋白的结构和功能发生改变，且相应的信号通路也受到影响 ...
杨文静
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丙肝核心抗原-CD40L胞外段真核表达载体的构建及其免疫原性分析
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2013 目的构建丙肝核心抗原-CD40L胞外段融合蛋白真核表达载体,并探讨其免疫原性。方法应用基因重组技术在原有载体的基础上构建真核表达载体pcDNA3.1-core-CD40L并加以鉴定。该表达质粒肌肉内注射免疫小鼠,ELISA法检测小鼠外周血中抗丙肝核心抗体,流式细胞仪检测小鼠外周血T淋巴细胞亚型,real time PCR法检测外周血单个核细胞内细胞因子,CTL杀伤实验检测小鼠脾淋巴细胞的杀伤活性。结果构建了真核表达载体pcD-NA3.1-core-CD40L ...
陈佳玉 +4 more
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Characterization of NSE monoclonal antibodies and establishment of a double-antibody sandwich ELISA assay [PDF]
, 2012 通讯作者，E-mail: xtli@ xmu.edu.cn 作者简介: 丁焕弟( 1985 年－ ) ，女，在读硕士，主要从事抗肿瘤单克 隆抗体及诊断试剂盒的研究，E-mail: dinghuandi1125 @163.com。[中文文摘]目的:制备并鉴定NSE(Neuron-specific enolase)单克隆抗体,建立可检测NSE蛋白的双抗夹心ELISA方法。方法:用本实验室已表达纯化的NSE融合蛋白免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备单克隆抗体。采用WB、IP、IF ...
丁焕弟 +5 more
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