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Characterization of a Novel Alternatively Spliced Variant from Human FMR1 Gene and Function of Its Encoded Product [PDF]
, 2017 脆性X智力障碍1基因（fragileXmentalretardation1gene，FMR1）编码一个选择性RNA结合蛋白，称脆性X智力低下蛋白(fragileXmentalretardationprotein，FMRP)。该蛋白表达减少或缺失可导致一种常见的遗传性智力缺陷疾病，称脆性X综合征（fragileXsyndrome，FXS）。FMR1基因的可变剪接与FMRP蛋白表达关系密切。不同的剪接方式会产生不同的转录本，最后导致FMRP蛋白的结构和功能发生改变，且相应的信号通路也受到影响 ...
杨文静
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2010 目的构建MYCT-1（myc target）基因真核表达载体,观察其转染胃粘膜GES-1细胞系后的表达。方法用RT-PCR法合成MYCT-1 cDNA,克隆至表达载体pcDNA3.1上,测序验证无突变发生。将表达载体转染GES-1细胞,用RT-PCR和Western blot检测MYCT-1基因的表达。结果限制性内切酶酶切和DNA测序证实成功克隆了MYCT-1 cD-NA全长并正确插入了表达载体,在GES-1细胞中检测到MYCT-1 mRNA和蛋白。结论成功构建了MYCT-1真核表达载体,可在GES ...
梅旭, 刘政, 邱广斌
doaj
Study of Pelo deficiency mediated antiviral activity [PDF]
, 2012 果蝇是研究抗病毒天然免疫以及病毒与宿主相互作用的理想模型。我们以果蝇C病毒（DrosophilaCVirus，DCV）为病原体对已有的突变体果蝇库进行筛选，找到了一个对DCV感染更为抵抗的果蝇株并鉴定出其体内Pelo基因的表达量下降。通过基因敲除和表型回复实验，我们证实了Pelo基因的缺失的确可以使果蝇对DCV的感染更为抵抗。此外，DCV以及其他多种病毒的复制在Pelo基因敲除型果蝇中都变慢，说明Pelo基因缺陷可能介导了广谱的抗病毒免疫。 我们研究发现，Pelo并不参与目前已知的果蝇抗病毒免疫途径 ...
吴秀榕
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2005 目的 构建表达反义血管内皮生长因子165（VEGF165）的真核表达载体,观察其对人乳腺癌细胞MCF- 7的影响,探讨反义基因治疗乳腺癌的可行性。方法 应用基因重组技术,将人VEGF165cDNA反向克隆入pcDNA3真核表达载体中,构建VEGF165反义基因的真核表达载体,将此表达载体转染人乳腺癌细胞MCF -7,观察转染前后MCF 7的VEGF165表达及细胞生长周期。结果 成功构建出VEGF165反义RNA真核表达载体,反义质粒转染后MCF -7细胞VEGF165表达下降,G1期细胞增加 ...
李国栋, 宋燕, 刘力华, 段秀梅
doaj
Studies on the regulation of membrane microdomains (lipid rafts) / Flot to mitogen-activated protein kinase signaling pathway and its effect on reversing multidrug resistance of hepatocellular carcinoma cells [PDF]
, 2015 目的： 1.构建耐药肝癌细胞模型。 2.检测Flot下调对ERK1/2信号通路的影响，明确能否通过Flot调控ERK1/2信号通路从而实现肝癌细胞耐药性的逆转。 3.检测脂筏破坏剂甲基-β-环糊精破坏脂筏结构对ERK1/2的影响，探索脂筏与ERK1/2之间的关联。 4.检测下调Flot对耐药肝癌细胞侵袭能力的影响。 5.构建过表达质粒Flot1/pcDNA3.1（+）、Flot2/pcDNA3.1（+），为后续研究工作奠定基础。 方法： 1.用阿霉素大剂量冲击法诱导细胞，Celltiter ...
王亚丽
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Characterization of NSE monoclonal antibodies and establishment of a double-antibody sandwich ELISA assay [PDF]
, 2012 通讯作者，E-mail: xtli@ xmu.edu.cn 作者简介: 丁焕弟( 1985 年－ ) ，女，在读硕士，主要从事抗肿瘤单克 隆抗体及诊断试剂盒的研究，E-mail: dinghuandi1125 @163.com。[中文文摘]目的:制备并鉴定NSE(Neuron-specific enolase)单克隆抗体,建立可检测NSE蛋白的双抗夹心ELISA方法。方法:用本实验室已表达纯化的NSE融合蛋白免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备单克隆抗体。采用WB、IP、IF ...
丁焕弟 +5 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2006 目的构建人regucalcin（RGN）全长cDNA的真核表达载体,观察其在人肾皮质近曲小管上皮细胞（HK-2细胞）中表达。方法用RT-PCR技术扩增获得人HK-2细胞RGN全长cNDA,将扩增的产物连接入pMD18-T克隆载体上,将重组质粒转化入大肠杆菌DH5α内并提取质粒,双酶切鉴定、DNA测序鉴定准确,再用双酶切方法将RGN基因定向连接到真核表达载体pEGFP-N1中,构成pEGFP-RGN,将pEGFP-RGN转化入大肠杆菌DH5α内并提取质粒,双酶切鉴定、DNA测序鉴定准确 ...
徐洪 +4 more
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pcDNA3.1-flag-pygo2真核表达载体的构建及在C6细胞中的表达
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2008 目的构建pcDNA3.1-flag-pygo2真核表达载体并在C6细胞中进行表达。方法从小鼠脑胶质细胞中提取总RNA,RT-PCR法反转录合成c DNA,设计引物,调取目的片段,与pcDNA3.1-flag载体连接后转化大肠杆菌DH5α,LB平板筛选菌落,提取质粒。重组质粒pcDNA 3.1-flag-pygo2经过酶切鉴定及测序后,阳离子脂质体法转染C6细胞并经免疫细胞化学染色及蛋白印迹检测重组体的表达。结果重构质粒pcDNA 3.1-flag-pygo2经限制性核酸内切酶EcoRⅠ ...
王海东 +5 more
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The mechanism and function of extracellular matrix protein Mindin in the colon cancer progression [PDF]
, 2015 在世界范围内，结直肠癌是临床上常见的恶性肿瘤之一。结肠癌的发病机制也在不断细致、深入的研究。然而结肠癌这种实体肿瘤不像单纯的肠癌细胞系。相反，它是由多种类型的细胞和细胞外基质组成的功能失调的器官。细胞外基质是肿瘤微环境的重要组成部分，包含各种各样的细胞因子和代谢产物，具有向细胞传导各种环境信号的作用。这些信号对于细胞生命过程的方方面面都必不可少，包括增殖、分化和死亡等。然而，细胞外基质蛋白在结肠癌发生发展的演变过程中的作用尚未完全明确。 分泌型的细胞外基质蛋白Mindin作为Mindin-F ...
肖传兴
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2011 目的构建卵巢特异启动子-1（ovarian-specific promoter,OSP-1）调控白介素-24基因（Interleukin-24,IL-24）表达的真核表达载体。方法通过RT-PCR方法从人外周血基因组中扩增IL-24基因片段,应用基因重组技术将0SP-1启动子片段插入到pcDNA3.0真核表达载体,替换pcDNA3.0载体的CMV启动子与增强子序列,然后将克隆的IL-24基因片段插入到pcDNA3.0-OSP-1载体的OSP-1启动子的下游,从而构建成由OSP-1启动子调控IL ...
祝贺 +4 more
doaj