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皱纹盘鲍HdhTPX2基因在毕赤酵母中的表达及抗氧化活性研究 [PDF]
为研究皱纹盘鲍Haliotis discus hannai Ino硫氧还蛋白过氧化物酶(TPX2)蛋白的抗氧化活性,将HdhTPX2基因克隆至pPIC9K载体,通过电击转化至毕赤酵母GS115菌株中,获得重组表达质粒pPIC9K-HdhTPX2,经甲醇诱导及亲和层析纯化得到重组HdhTPX2蛋白,并进行质谱鉴定及体外抗氧化功能检测。结果表明:本研究中成功构建了重组毕赤酵母菌株GS115/pPIC9K-HdhTPX2,经表达条件的优化,在pH为7的培养基中用0.5%甲醇诱导表达72 h ...
乔琨 +9 more
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目的探讨PAI的发卡样siRNA真核表达载体PAI siRNA对人肝癌HpG2细胞VEGF表达的影响。方法设计短发夹状PAI siRNA的寡核苷酸链,将其插入到真核细胞表达载体pSilencerTM 2.1-U6 neo载体中,构建的重组载体后;采用脂质体转染方法将构建的重组载体导入人肝癌细胞HpG2中,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、westernblot法分别检测转染细胞PAI mRNA和蛋白的表达变化以及对VEGF表达的影响。结果经测序证明PAI siRNA序列正确;转染PAI ...
杜建时, 赵晴, 张静菊, 王嘉桔
doaj
Oral immunization studies relied on the live attenuated bacteria in vivo expressing antimicrobial peptides AS-prohepc2 and Scy1 in fish [PDF]
抗菌肽是鱼、虾、贝等非特异性免疫防御系统的主要成分之一,在防御外源性病原体入侵方面起着重要作用。作为一类独特的天然免疫活性物质,抗菌肽具有广谱的抗微生物活性和免疫调节活性。迄今从鱼类、甲壳动物、贝类等海洋动物中已分离获得了多种不同类型的抗菌肽,并揭示了其基因和蛋白结构以及表达特性、抗微生物活性以及某些抗菌机理;现有试验结果亦逐渐证明抗菌肽有望作为抗生素一定程度的替代品,在水产养殖业及其他行业具有应用前景,但迄今对其有效利用途径且进入机体后的免疫效应知之甚少。 天然运载载体(如细菌、病毒和哺乳动物细胞等 ...
陈贝
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目的构建HSV-TK单基因和TK/hIL12融合基因的真核表达载体。方法 PCR扩增质粒pGT60-hIL12中HSV-TK与hIL12治疗基因片段,同时引入pcDNA3.1(+)多克隆酶切位点,构建HSV-TK单基因及其与hIL12融合基因的真核表达载体。结果 DNA测序分析、限制性双酶切鉴定证实构建的真核表达载体中治疗基因的序列、大小和方向正确。结论成功构建了pcDNA3.1-TK和pcDNA3.1-TK/hIL12真核表达载体,为进一步探索HSV-TK与hIL12基因的协同抗瘤作用提供实验基础。
杜晓媛 +5 more
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Study of hnRNPA1 and TFF3 on the biological function of BGC-823 cells [PDF]
胃癌是我国常见的恶性肿瘤之一,肿瘤的形成以及恶变,是一个涉及多种癌基因和抑癌基因参与作用的复杂病理过程。TFF3是三叶因子家族成员之一,是一种小分子粘膜分泌蛋白,其与胃癌的关系以及在粘膜上皮细胞中的重建作用已经成为大家关心和研究的热点之一。hnRNPA1在RNA调节中的作用及其在细胞凋亡和增殖等肿瘤发生、发展机制中的作用,表明其与肿瘤的形成和发展息息相关。本实验首次在胃癌细胞系BGC823中探讨TFF3与hnRNPA1肿瘤细胞生物学功能的影响,并进行二者结合性的初步探讨。 本实验通过构建Myc ...
王海星
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目的构建(BbxⅡ)基因真核表达载体,为研究家蚕素Ⅱ在哺乳动物细胞中的生物学作用奠定基础。方法以含有BbxⅡcDNA的PUC57质粒为模板,采用聚合酶链式反应(PCR)扩增BbxⅡcDNA片段。真核表达载体PcD-NA3.1及PCR产物经双酶切后连接,转化大肠杆菌DH-5α感受态菌,获得重组载体PcDNA3.1-Bbx/His,进行酶切鉴定和测序鉴定。结果 PCR获得与预期大小一致约300 bp的特异性DNA,重组载体PcDNA3.1-BbxⅡ/His经双酶切及测序鉴定证实 ...
李洪霞 +5 more
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Roles of AC-cathB-1, a Cathepsin B-like Cysteine Protease of Angiostrongylus cantonensis, in Host Gut Invasion [PDF]
广州管圆线虫是引起嗜酸性粒细胞增多性脑膜炎和脑膜脑炎的主要病原生物,该病也因此被命名为广州管圆线虫病。广州管圆虫属于管圆线虫属,中间宿主为软体动物,终末宿主为啮齿类动物,人因误食未煮熟的携带其第三期幼虫(L3)的软体动物而意外感染,L3污染的其他食物或水源也可导致感染。近年来,随着人们饮食习惯的改变和水陆交通日趋发达,该病的流行呈上升趋势。然而,我们在其诊断和治疗方面仍缺乏有效手段,因此对其的进一步研究很有必要。 小肠壁作为机体防御病原体入侵的天然屏障之一 ...
龙瀛
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人FOXC2真核表达载体的构建及稳定转染C-33A细胞系的建立
目的构建人FOXC2真核表达载体,并转染人宫颈癌C-33A细胞,建立稳定转染的细胞系。方法应用PCR方法从人FOXC2克隆中扩增其cDNA编码区序列,并将其构建于pcDNA3.1(-)真核表达载体。经PCR和测序鉴定后,利用脂质体进行宫颈癌C-33A细胞的转染,应用G418筛选出稳定表达FOXC2的细胞系,通过RT-PCR及Westernblot法检测FOXC2的表达情况。结果成功构建pcDNA3.1(-)/FOXC2真核表达载体,建立稳定转染FOXC2的C-33A细胞系,并鉴定了FOXC2目的基因在C-
成荣杰, 付艳
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含副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus) Fla I基因真核表达重组质粒的构建 [PDF]
用ClaⅠ /EcoRⅠ双酶切带有副溶血弧菌 (Vibrioparahaemolyticus)极鞭毛蛋白FlaI基因的质粒pMD18 FlaI,回收目的基因片段 ,插入到真核细胞表达载体pIRESneo同样经ClaⅠ /EcoRⅠ切开的窗口中 ,成功地将FlaI克隆到pIRESneo中 ,获得有意义的重组质粒pIRESneo FlaI.构建的pIRESneo FlaI真核表达重组质粒 ...
丁少雄 +5 more
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丙肝核心抗原-CD40L胞外段真核表达载体的构建及其免疫原性分析
目的构建丙肝核心抗原-CD40L胞外段融合蛋白真核表达载体,并探讨其免疫原性。方法应用基因重组技术在原有载体的基础上构建真核表达载体pcDNA3.1-core-CD40L并加以鉴定。该表达质粒肌肉内注射免疫小鼠,ELISA法检测小鼠外周血中抗丙肝核心抗体,流式细胞仪检测小鼠外周血T淋巴细胞亚型,real time PCR法检测外周血单个核细胞内细胞因子,CTL杀伤实验检测小鼠脾淋巴细胞的杀伤活性。结果构建了真核表达载体pcD-NA3.1-core-CD40L ...
陈佳玉 +4 more
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