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Effect of Trefoil factor 1 on induced expression of intercellular adhesion molecule 1 and vascular cell adhesion molecule 1 [PDF]
, 2009 研究目的：探讨肿瘤坏死因子-α（TumorNecrosisFactor-α，TNF-α）刺激后胃黏膜上皮细胞GES-1细胞间粘附分子1(Intercellularadhesionmolecule1，ICAM1)、血管细胞黏附分子1（Vascularcelladhesionmolecule1，VCAM1）表达变化，以及TFF1（Trefoilfactorfamily1，TFF1）过表达对GES-1细胞中TNF-α诱导的ICAM1、VCAM1表达的影响。 研究方法：以永生化的胃黏膜上皮细胞株GES ...
杨晓宁
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2010 目的构建核转录因子κB抑制蛋白激酶（inhibitor of kappa B kinase,IKK）β真核表达载体,以便进一步探讨其生物学作用。方法从人正常肝细胞L02中提取RNA,并利用IKKβ特异性引物通过RT-PCR方法扩增了IKKβcD-NA,并克隆入pcDNA3载体中,构建重组载体pcDNA3-IKKβ。将重组载体转染入HEK293细胞中,并通过免疫印迹方法检测IKKβ的表达。结果酶切及测序结果显示,重组质粒构建成功;免疫印迹结果显示 ...
张冬梅 +6 more
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Gene cloning and functional study of a serine proteinase homolog (Sp-SPH) involved in immune defense in the mud crab Scylla paramamosain [PDF]
, 2013 拟穴青蟹等无脊椎动物依靠先天免疫系统识别、抵御入侵病原微生物，该防御过程需要宿主多种蛋白酶参与反应。丝氨酸蛋白酶及其同系物是生物体内重要的酶分子，它们不仅参与机体消化、胚胎发育、组织重建、细胞分化及血管形成等过程，而且在抵御病原菌入侵过程亦发挥重要作用。前期研究中，我们通过拟穴青蟹血细胞裂解上清液与病原菌互作技术分离获得了能够识别结合副溶血性弧菌的拟穴青蟹丝氨酸蛋白酶同系物（Scyllaparamamosainserineproteinasehomolog，Sp-SPH）蛋白，为进一步了解Sp ...
张秋霞
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2004 ［目的 l 构建人肝豆状核变性病ATP7B基因野生型及常见突变型的小鼠肝脏特异性表达载体 ALB-ATP7B, 为制备转基因小鼠及相关基因治疗作准备。【方法】定点突变法获取人群中常见的Arg778Leu及 Hisl069Gln两种ATP7B基因突变体，定向克隆将小鼠白蛋白启动子ALB序列及野生和突变的ATP7B基因亚克 隆至真核表达载体kbpala上， 得到可在小鼠肝脏特异性表达的人ATP7B基因正常及突变型真核表达载体 ALB-ATP7B。【结果】经测序及酶切鉴定证实， 真核表达载体ALB ...
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人DNA 聚合酶β 全长cDNA 的克隆、鉴定及真核表达载体的构建
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2002 【目的】克隆人类DNA 聚合酶(pol-β)基因全长cDNA, 构建该基因的真核高效表达载体。【方法】抽提人胚肺纤 维细胞HLF 总RNA 进行RT-PCR 扩增, 用pGEM-T 载体经T/A 克隆、DNA 测序确定后, 用双酶切将pol-β 全长cDNA 定向 克隆到绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-C1 , 转染大肠杆菌DH5α, 筛选阳性克隆, 双酶切鉴定重组质粒。【结果】经RT-PCR 获 得1.03 kb 的产物, 经DNA 测序, 确定所扩增片段为人类pol-β 基因全长cDNA ...
杜柳涛, 高 昆, 何 云
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激活素受体相互作用蛋白ARIPzip真核表达载体的构建及表达
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2009 目的构建激活素受体相互作用蛋白（activin receptor interacting protein zip,ARIPzip）真核表达载体,以便进一步探讨其生物学作用。方法从小鼠成纤维细胞3T3中提取RNA,并利用ARIPzip特异性引物通过RT-PCR方法扩增了ARIPzip cDNA,并克隆入pcDNA-Flag载体中,构建重组载体pcDNA-F-ARIPzip。将重组载体转染入HEK293细胞中,并通过免疫印迹方法检测ARIPzip的表达。结果酶切及测序结果显示,重组质粒构建成功 ...
裴颖 +7 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2010 目的构建pEGFP-N1/VEGF真核表达质粒,并进行鉴定。方法利用RT-PCR方法从组织中提取VEGF的基因片段,与pMD18-T载体连接,构建pMD18-T/VEGF重组质粒,酶切后与pEGFP-N1真核表达载体连接,构建pEGFP-N1/VEGF真核表达质粒,进行测序、酶切鉴定,表明质粒构建成功。结果本实验成功构建了pEGFP-N1/VEGF真核表达质粒。结论为进一步研究利用VEGF基因修饰骨组织工程骨,促进血管再生提供实验基础。
张明磊 +4 more
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真核表达质粒PcDNA3.1（+）-带有白蛋白信号肽的Vasostatin（120-180aa）的构建及其在体内外细胞中的表达
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2011 目的构建真核表达质粒PcDNA3.1（+）-带有白蛋白信号肽的Vasostatin（120-180aa）并了解其在体内外真核细胞中的表达。方法将带有白蛋白信号肽的Vasostatin（120-180aa）的逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）产物克隆至pcDNA3.1（+）真核表达载体上,经酶切鉴定及测序分析证明构建成功后,以脂质体介导法转染体外培养的真核293T细胞及注射入鼠骨骼肌细胞中,了解其在体内外真核细胞中的表达情况。结果我们获取了包含带有白蛋白信号肽的Vasostatin（120-180aa ...
刘建巨 +6 more
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The Transcription Factor FoxO3a Inhibits Proliferation, Promotes Apotosis and Differerntiation of K562 Cell [PDF]
, 2012 慢性粒细胞白血病一旦发展至急变期，预后极差，目前的各种治疗方法均不能有效控制其病情进展，多在数月内死亡，因而加强对急变期的研究具有很重要的科学及临床意义。急变发生机制中，BCR-ABL融合基因大量表达、继发性多种基因突变以及凋亡受阻、耐药等机制逐渐已经被阐明，但有关分化障碍的机制研究很少且不明确[1;2]。分化障碍往往与信号通路中的转录因子异常有关，FoxO3a是FOX转录因子家族是一个重要成员，是BCR-ABL/PI3K/AKT信号通路的下游因子，而其在慢粒急变中的功能失活 ...
李楠楠
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2008 目的构建人PTEN基因的真核表达载体并在COS-7细胞中高效表达。方法从人喉粘膜组织中分离总RNA,经逆转录多聚酶链反应（RT-PCR）得到PTEN全基因。克隆入PTEM-T easy载体上,经过PCR、酶切鉴定为阳性的克隆,进行测序分析。然后将所获得的基因定向克隆入PCI-neo载体中构建表达载体。并将其转入COS-7细胞中进行瞬时表达。结果反转录PCR扩增后的产物,在约1.4 kb处可以看见特异性条带,序列分析表明与GenBank中的PTEN基因序列相同。PCI-PTEN真核载体转染COS ...
陈鸥 +5 more
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