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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2009 目的在人骨髓间充质干细胞内大量稳定的表达人白血病抑制因子（human Leukemia Inhibitory Factor,hLIF）。方法应用RT-PCR方法从人蜕膜组织中扩增出白血病抑制因子,并将其构建于pcDNA3.1真核表达载体上。利用脂质体进行基因骨髓间充质干细胞的转染。利用G418进行基因的稳定表达筛选。通过RT-PCR和Western blot方法进行基因表达的检测。结果成功扩增出人白血病抑制因子基因,成功构建hLIF-pcDNA3.1真核表达载体。转染LIF-pcDNA3 ...
杨春辉, 杜珍武, 杨光, 尹维田
doaj
Recombinant production, antimicrobial and antiviral activities of both Scygonadin from Scylla paramamosain and hybrid peptide Scy-hepc [PDF]
, 2011 抗菌肽（antimicrobialpeptide）是先天性免疫的重要组分，广泛存在于生物界的各个门类，进化上相对保守，具有广谱的抗菌、抗病毒和抗肿瘤等作用。抗菌肽具有可见的应用前景，但直接从动物体提取抗菌肽不适于未来产业化的要求。本研究利用本实验室分离鉴定的拟穴青蟹抗菌肽Scygonadin基因和大黄鱼抗菌肽Hepcidin基因，通过基因工程技术构建了Scygonadin基因及与大黄鱼抗菌肽Hepcidin基因联合的基因工程稳定表达菌株，优化其表达与纯化工艺，研究其基因表达产物的抗菌与抗病毒活性 ...
彭会
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2007 【目的】构建载有小鼠抵抗素（resistin）基因及其反义核酸的重组真核表达质粒，探讨抵抗素对3T3-L1脂肪细胞葡萄糖摄取的影响。【方法】用RT-PCR技术从小鼠脂肪组织扩增抵抗素基因cDNA，A／T克隆于pGEM-T载体，再亚克隆于pcDNA3．1（＋）和pcDNA3．1（-）真核表达载体，构建载有小鼠抵抗素（resistin）基因及其反义核酸的重组真核表达质粒pcDNA3．1^（＋）resistin和pcDNA3．1^（-）-resistin^（-）。将pcDNA3．1^（-）resistin^（-
李芳萍 +4 more
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Study on the abnormal expression of the transcription factor FoxO3a and its mechanism in chronic myelocytic leukemia [PDF]
, 2011 背景：慢性粒细胞白血病(ChronicMyelocyticLeukemia，CML)是一种致命性的恶性造血干细胞疾病，发生源于人9号和22号染色体的易位，导致费城染色体t(9;22)(q34;q11)和融合蛋白P210BCR/ABL的形成。P210BCR/ABL显示异常增强的酪氨酸激酶活性，过度激活下游Ras、PI3K/Akt等信号通路导致肿瘤的发生。FoxO蛋白家族作为转录因子通过调节细胞内多种重要基因的表达，而介导细胞周期、DNA损伤修复、凋亡、氧化应激、细胞分化代谢等细胞生理过程 ...
杜艳
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2010 目的构建靶向EZH2基因的shRNA真核表达载体质粒,为利用RNA干扰技术探索EZH2基因的作用的研究做准备。方法根据EZH2 mRNA序列设计并合成shRNA寡核苷酸片段,退火形成双链并连接入pGenesil-2载体,并进行酶切鉴定和测序。结果酶切证明构建的shRNA已插入载体中,经测序证明与设计相同。结论成功构建靶向EZH2基因的shRNA真核表达载体,为进一步研究EZH2基因在肿瘤细胞中的作用机制及后续的体内外RNAi实验研究奠定了基础。
卢绩 +6 more
doaj
Approaches to fish DNA vaccine study [PDF]
, 2005 福建省自然科学基金(B0410022);; 福建省青年创新基金 ...
庄峙厦 +4 more
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2002 【目的】研究bcl-2 基因(bcl-2)在PC12 细胞中的表达。【方法】构建真核表达载体pcDNA3-bcl-2 , 采用脂质体介 导将重组质粒导入PC12 细胞, Western blo t 和原位免疫组化检测外源基因表达。【结果】本实验成功构建了真核表达载体 pcDNA3-bcl-2, 并用脂质体介导的方法获得了稳定表达bcl-2 的细胞克隆;Western blo t 显示有26 ku 的蛋白质表达, bcl-2 单克 隆抗体免疫组化染色呈阳性反应。【结论】重组质粒pcDNA3-bcl ...
吴永青
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Biological effects of Axin gene expression in glioma C6 cells [PDF]
, 2006 目的研究Axin基因对神经胶质瘤细胞C6生物学特性及相关蛋白的影响。方法采用噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞生长曲线,应用流式细胞仪(FCM)测定细胞周期的变化,并用平板克隆形成实验对细胞克隆形成能力进行了检测。应用末端TdT酶标记技术(TUNEL)观察细胞凋亡及比率。采用免疫细胞化学染色法检测Ki67、CyclinD1、p53的表达。结果转染Axin基因使细胞周期在G1期阻滞;细胞增殖能力和细胞克隆形成能力均显著降低;细胞凋亡率增高;Ki67及CyclinD1低表达,p53高表达 ...
叶菁 +6 more
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2018 【目的】建立稳定miR-18a过表达及表达的人鼻咽癌细胞系，为研究miR-18a在鼻咽癌发生发展中 的功能奠定基础。【方法】将miR-18a前体的编码基因片段及miR-18a反义寡核苷酸克隆到慢病毒载体中，DNA 测序鉴定；将构建好的载体转染293T细胞，获得重组miR-18a过表达及抑制表达的慢病毒载体，感染人鼻咽癌细 胞CNE1和CNE2，嘌呤霉素筛选获得稳定干扰miR-18a表达及过表达miR-18a的细胞系，PCR及western blot鉴 定。【结果】成功构建真核表达的慢病毒miR ...
常利红 +5 more
doaj
, 2006 【目的】构建小鼠端粒酶蛋白亚单位（mouse telomerase reverse transcriptase，mTERT）基因重组腺病毒载体，为下一步研究其体外表达和动物实验研究提供基础。【方法】从肝癌细胞中提取总RNA。采用RT-PER技术扩增mTERT的基因编码区序列，将序列定向克隆至真核表达载体pAC，将此表达质粒与腺病毒重组质粒pJM17共同转染293细胞，经同源重组产生重组腺病毒载体Ad-mTERT，纯化后的重组腺病毒载体Ad-mTERT在293细胞大量扩增并通过氯化铯密度梯度离心法纯化 ...
冯炼强 +7 more
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