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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2010 目的构建MYCT-1（myc target）基因真核表达载体,观察其转染胃粘膜GES-1细胞系后的表达。方法用RT-PCR法合成MYCT-1 cDNA,克隆至表达载体pcDNA3.1上,测序验证无突变发生。将表达载体转染GES-1细胞,用RT-PCR和Western blot检测MYCT-1基因的表达。结果限制性内切酶酶切和DNA测序证实成功克隆了MYCT-1 cD-NA全长并正确插入了表达载体,在GES-1细胞中检测到MYCT-1 mRNA和蛋白。结论成功构建了MYCT-1真核表达载体,可在GES ...
梅旭, 刘政, 邱广斌
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Roles of AC-cathB-1, a Cathepsin B-like Cysteine Protease of Angiostrongylus cantonensis, in Host Gut Invasion [PDF]
, 2015 广州管圆线虫是引起嗜酸性粒细胞增多性脑膜炎和脑膜脑炎的主要病原生物，该病也因此被命名为广州管圆线虫病。广州管圆虫属于管圆线虫属，中间宿主为软体动物，终末宿主为啮齿类动物，人因误食未煮熟的携带其第三期幼虫（L3）的软体动物而意外感染，L3污染的其他食物或水源也可导致感染。近年来，随着人们饮食习惯的改变和水陆交通日趋发达，该病的流行呈上升趋势。然而，我们在其诊断和治疗方面仍缺乏有效手段，因此对其的进一步研究很有必要。 小肠壁作为机体防御病原体入侵的天然屏障之一 ...
龙瀛
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2005 目的 构建表达反义血管内皮生长因子165（VEGF165）的真核表达载体,观察其对人乳腺癌细胞MCF- 7的影响,探讨反义基因治疗乳腺癌的可行性。方法 应用基因重组技术,将人VEGF165cDNA反向克隆入pcDNA3真核表达载体中,构建VEGF165反义基因的真核表达载体,将此表达载体转染人乳腺癌细胞MCF -7,观察转染前后MCF 7的VEGF165表达及细胞生长周期。结果 成功构建出VEGF165反义RNA真核表达载体,反义质粒转染后MCF -7细胞VEGF165表达下降,G1期细胞增加 ...
李国栋, 宋燕, 刘力华, 段秀梅
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2006 目的构建人regucalcin（RGN）全长cDNA的真核表达载体,观察其在人肾皮质近曲小管上皮细胞（HK-2细胞）中表达。方法用RT-PCR技术扩增获得人HK-2细胞RGN全长cNDA,将扩增的产物连接入pMD18-T克隆载体上,将重组质粒转化入大肠杆菌DH5α内并提取质粒,双酶切鉴定、DNA测序鉴定准确,再用双酶切方法将RGN基因定向连接到真核表达载体pEGFP-N1中,构成pEGFP-RGN,将pEGFP-RGN转化入大肠杆菌DH5α内并提取质粒,双酶切鉴定、DNA测序鉴定准确 ...
徐洪 +4 more
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Antimicrobial activities of Scygonadin2 and Sphistin from Scylla paramamosain and the synergistic effects with antibiotics against bacteria [PDF]
, 2015 抗生素（antibiotics）作为最广泛应用的抗细菌药物，目前被广泛应用于水产养殖业中，但超量、滥用抗生素造成了水产品药物残留超标等一系列问题，如何控制抗生素的过量应用是亟待解决的重要科学与生产问题，因此寻找抗生素的有效替代品是目前国内外本领域的研究热点之一。抗菌肽（antimicrobialpeptide）是先天性免疫中的重要免疫活性因子，具有广谱的抗菌性，且不会产生耐药性，在所有替代抗生素的选择中，抗菌肽被认为是普遍存在于各种生物中由基因编码的“天然抗生素”，是抗生素的最佳替代品之一 ...
刘杰
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Gene cloning and functional study of a serine proteinase homolog (Sp-SPH) involved in immune defense in the mud crab Scylla paramamosain [PDF]
, 2013 拟穴青蟹等无脊椎动物依靠先天免疫系统识别、抵御入侵病原微生物，该防御过程需要宿主多种蛋白酶参与反应。丝氨酸蛋白酶及其同系物是生物体内重要的酶分子，它们不仅参与机体消化、胚胎发育、组织重建、细胞分化及血管形成等过程，而且在抵御病原菌入侵过程亦发挥重要作用。前期研究中，我们通过拟穴青蟹血细胞裂解上清液与病原菌互作技术分离获得了能够识别结合副溶血性弧菌的拟穴青蟹丝氨酸蛋白酶同系物（Scyllaparamamosainserineproteinasehomolog，Sp-SPH）蛋白，为进一步了解Sp ...
张秋霞
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pcDNA3.1-flag-pygo2真核表达载体的构建及在C6细胞中的表达
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2008 目的构建pcDNA3.1-flag-pygo2真核表达载体并在C6细胞中进行表达。方法从小鼠脑胶质细胞中提取总RNA,RT-PCR法反转录合成c DNA,设计引物,调取目的片段,与pcDNA3.1-flag载体连接后转化大肠杆菌DH5α,LB平板筛选菌落,提取质粒。重组质粒pcDNA 3.1-flag-pygo2经过酶切鉴定及测序后,阳离子脂质体法转染C6细胞并经免疫细胞化学染色及蛋白印迹检测重组体的表达。结果重构质粒pcDNA 3.1-flag-pygo2经限制性核酸内切酶EcoRⅠ ...
王海东 +5 more
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Studies on the regulation of membrane microdomains (lipid rafts) / Flot to mitogen-activated protein kinase signaling pathway and its effect on reversing multidrug resistance of hepatocellular carcinoma cells [PDF]
, 2015 目的： 1.构建耐药肝癌细胞模型。 2.检测Flot下调对ERK1/2信号通路的影响，明确能否通过Flot调控ERK1/2信号通路从而实现肝癌细胞耐药性的逆转。 3.检测脂筏破坏剂甲基-β-环糊精破坏脂筏结构对ERK1/2的影响，探索脂筏与ERK1/2之间的关联。 4.检测下调Flot对耐药肝癌细胞侵袭能力的影响。 5.构建过表达质粒Flot1/pcDNA3.1（+）、Flot2/pcDNA3.1（+），为后续研究工作奠定基础。 方法： 1.用阿霉素大剂量冲击法诱导细胞，Celltiter ...
王亚丽
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2011 目的构建卵巢特异启动子-1（ovarian-specific promoter,OSP-1）调控白介素-24基因（Interleukin-24,IL-24）表达的真核表达载体。方法通过RT-PCR方法从人外周血基因组中扩增IL-24基因片段,应用基因重组技术将0SP-1启动子片段插入到pcDNA3.0真核表达载体,替换pcDNA3.0载体的CMV启动子与增强子序列,然后将克隆的IL-24基因片段插入到pcDNA3.0-OSP-1载体的OSP-1启动子的下游,从而构建成由OSP-1启动子调控IL ...
祝贺 +4 more
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2004 ［目的 l 构建人肝豆状核变性病ATP7B基因野生型及常见突变型的小鼠肝脏特异性表达载体 ALB-ATP7B, 为制备转基因小鼠及相关基因治疗作准备。【方法】定点突变法获取人群中常见的Arg778Leu及 Hisl069Gln两种ATP7B基因突变体，定向克隆将小鼠白蛋白启动子ALB序列及野生和突变的ATP7B基因亚克 隆至真核表达载体kbpala上， 得到可在小鼠肝脏特异性表达的人ATP7B基因正常及突变型真核表达载体 ALB-ATP7B。【结果】经测序及酶切鉴定证实， 真核表达载体ALB ...
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