Results 51 to 60 of about 1,252 (143)
The Transcription Factor FoxO3a Inhibits Proliferation, Promotes Apotosis and Differerntiation of K562 Cell [PDF]
, 2012 慢性粒细胞白血病一旦发展至急变期，预后极差，目前的各种治疗方法均不能有效控制其病情进展，多在数月内死亡，因而加强对急变期的研究具有很重要的科学及临床意义。急变发生机制中，BCR-ABL融合基因大量表达、继发性多种基因突变以及凋亡受阻、耐药等机制逐渐已经被阐明，但有关分化障碍的机制研究很少且不明确[1;2]。分化障碍往往与信号通路中的转录因子异常有关，FoxO3a是FOX转录因子家族是一个重要成员，是BCR-ABL/PI3K/AKT信号通路的下游因子，而其在慢粒急变中的功能失活 ...
李楠楠
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2008 目的构建人PTEN基因的真核表达载体并在COS-7细胞中高效表达。方法从人喉粘膜组织中分离总RNA,经逆转录多聚酶链反应（RT-PCR）得到PTEN全基因。克隆入PTEM-T easy载体上,经过PCR、酶切鉴定为阳性的克隆,进行测序分析。然后将所获得的基因定向克隆入PCI-neo载体中构建表达载体。并将其转入COS-7细胞中进行瞬时表达。结果反转录PCR扩增后的产物,在约1.4 kb处可以看见特异性条带,序列分析表明与GenBank中的PTEN基因序列相同。PCI-PTEN真核载体转染COS ...
陈鸥 +5 more
doaj
Cdc42-shRNA表达载体的构建及在肝癌细胞株的沉默效果
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2010 目的构建Cdc42-shRNA真核表达载体。方法合成Cdc42的基因干扰序列并定向插入到RNA干扰（RNAi）真核表达载体pGenesil-1质粒,通过测序进行鉴定。干扰质粒经脂质体Lipofectamine2000介导转染肝癌细胞,Westernblot方法检测沉默效率。结果测序证明干扰序列完全正确,Westernblot结果显示Cdc42-shRNA对肝癌细胞株内源性Cdc42有较好的沉默效果。结论成功构建了Cdc42-shRNA真核表达载体,为进一步研究Cdc42在基因治疗中的作用奠定基础。
解英俊 +3 more
doaj
The mechanism and function of extracellular matrix protein Mindin in the colon cancer progression [PDF]
, 2015 在世界范围内，结直肠癌是临床上常见的恶性肿瘤之一。结肠癌的发病机制也在不断细致、深入的研究。然而结肠癌这种实体肿瘤不像单纯的肠癌细胞系。相反，它是由多种类型的细胞和细胞外基质组成的功能失调的器官。细胞外基质是肿瘤微环境的重要组成部分，包含各种各样的细胞因子和代谢产物，具有向细胞传导各种环境信号的作用。这些信号对于细胞生命过程的方方面面都必不可少，包括增殖、分化和死亡等。然而，细胞外基质蛋白在结肠癌发生发展的演变过程中的作用尚未完全明确。 分泌型的细胞外基质蛋白Mindin作为Mindin-F ...
肖传兴
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小鼠Neuronatin基因真核表达载体构建及其蛋白产物的检测
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2008 【目的】 构建基因Nnat的真核表达载体pEGFP*9鄄N1/Nnat并在真核细胞中表达目的蛋白65377; 【方法】 RT*9鄄PCR法扩增Nnat基因编码区(ORF),利用基因克隆技术构建真核表达载体,酶切及测序进行鉴定;载体构建成功后转染HepG2细胞,观察融合蛋白在细胞中的定位,Western blot检测其在真核细胞中的表达65377;【结果】 RT*9鄄PCR法扩增出Nnat基因的两种亚型,相应的双酶切能够获得插入的目的基因片断,测序分析未发现突变 ...
doaj
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2009 目的构建pEGFP-N1/BMP-2真核表达质粒,并进行鉴定。方法利用RT-PCR方法从组织中提取骨形态发生蛋白（BMP-2）的基因片段,与pMD18-T载体连接,构建pMD18-T/BMP-2重组质粒,酶切后与pEGFP-N1真核表达载体连接,构建pEGFP-N1/BMP-2真核表达质粒,进行测序、酶切鉴定,表明质粒构建成功。结果通过测序、酶切鉴定,证明pMD18-T/BMP-2质粒构建成功。结论本实验成功构建了pEGFP-N1/BMP-2真核表达质粒,为进一步研究利用BMP ...
张明磊 +4 more
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hCAP-18/LL-37全长肽真核表达产物对树突状细胞分化成熟的影响
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2010 目的研究人源阳离子抗菌肽（hCAP）-18/LL-37全长肽真核表达产物对树突状细胞分化成熟的影响。方法将已构建的hCAP-18/LL-37全长肽真核表达载体pcDNA4/Myc-His-hCAP-18转染Hela细胞株,在转染后48 h收获培养上清;人外周血单个核细胞分离,体外定向诱导分化成树突状细胞（DC）;将转染后收获的培养上清与体外培养的DC共同孵育,48 h收获DC,经流式细胞仪检测DC表面分子CD83、CD86、CD40及HLA-DR的表达。结果FCM结果显示:pcDNA4/Myc-His ...
袁红艳, 许娜, 王凤丽, 常雅萍
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High efficiency expression of human KGF by Escherichia coli and construction of expression vector of KGF for eukarya microorganism [PDF]
, 2010 人角质细胞生长因子（keratinocytegrowthfactor，KGF）是成纤维生长因子（fibroblastgrowthfactor，FGF）家族的第七位成员，又名FGF-7。KGF由间质细胞分泌，通过旁分泌途径特异性地与其受体KGFR结合，促进上皮细胞的生长、增殖和分化，与皮肤创伤修复、组织和器官的发育、辐射损伤的修复以及一系列癌症的发生等生理过程密切相关，具有广阔的应用前景。但在人体中天然KGF的含量极低，不利于提取进行相关的研究和应用。因此 ...
卓山龄
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2009 目的研制高效表达型T载体用于基因的表达及蛋白功能分析。方法限制性内切酶EcoR V酶切真核表达载体pcDNA3,回收线性化质粒片段与三磷酸胸腺嘧啶脱氧核苷酸（dTTP）70℃退火,构成T克隆载体并回收纯化。将增强绿色荧光蛋白基因（EGFP）和中国旱獭α干扰素基因（cwIFNA5）分别扩增后直接克隆到新构建的表达型T载体,转化感受态细菌,挑选阳性菌并制备质粒瞬时转染真核细胞,荧光显微镜观察EGFP的表达,病毒保护试验检测中国旱獭α干扰素的生物学活性。结果成功构建了表达型T载体 ...
卢银平, 祝建芳, 刘朝, 董继华
doaj
Recombinant production, antimicrobial and antiviral activities of both Scygonadin from Scylla paramamosain and hybrid peptide Scy-hepc [PDF]
, 2011 抗菌肽（antimicrobialpeptide）是先天性免疫的重要组分，广泛存在于生物界的各个门类，进化上相对保守，具有广谱的抗菌、抗病毒和抗肿瘤等作用。抗菌肽具有可见的应用前景，但直接从动物体提取抗菌肽不适于未来产业化的要求。本研究利用本实验室分离鉴定的拟穴青蟹抗菌肽Scygonadin基因和大黄鱼抗菌肽Hepcidin基因，通过基因工程技术构建了Scygonadin基因及与大黄鱼抗菌肽Hepcidin基因联合的基因工程稳定表达菌株，优化其表达与纯化工艺，研究其基因表达产物的抗菌与抗病毒活性 ...
彭会
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